干細胞及其外泌體治療早發性卵巢功能不全的研究進展

早發性卵巢功能不全?（POI）是指女性在40周歲以前因妊娠以外的原因導致提前閉經，并伴有血清雌激素下降、促性腺激素升高的特征。

歐洲人類生殖和胚胎學學會?（ESHRE）將POI定義為40周歲以下女性，因除妊娠以外的原因導致閉經至少4個月，而且卵泡期血清檢查至少2次（2 次檢查間隔時間30d以上）出現卵泡刺激素（FSH）＞25 IU/L、雌二醇（E2）＜73.2pmol/L。

對于FSH＞40 IU/L的患者過去又稱為卵巢早衰POF）。

POI的病因較為復雜，仍有50%~90%的特發性患者未能明確病因，已知的病因包括：遺傳學因素、醫源性因素、自身免疫學、先天性酶缺乏、感染與環境因素等。

對于自身免疫因素引起的POI患者， 免疫抑制治療為其首選方式， 但長期應用仍存在免 疫功能缺陷所致的各類風險。?目前臨床傳統療法對有生育要求的患者無能為力。

干細胞（stem cells）是 一種具有自我更新能力及多向分化潛能的細胞，干細胞來源的外泌體是一種由干細胞分泌產生的微小囊泡，可攜帶多種生物活性物質。

近年來，?干細胞因其高度增殖、 多向分化等優勢被應用于 POI 的研究中，并取得一定療效。

本文就不同干細胞及其外泌體對POI的生物學作用和可能的作用機制進行綜述。

成體組織間充質干細胞用于 POI/POF 治療

人骨髓干細胞

基礎研究一：Herraiz等將hBMDSCs經尾靜脈注射入化療誘導POF小鼠及人卵巢移植小鼠（來自POF患者的卵巢皮質組織）兩種動物模型體內，可觀察到hBMDSCs 對卵巢組織的多重再生作用，包括增加局部血管形成、增加卵泡和基質細胞數目、恢復生育力等。 相比hBMDSCs，hBM-MSCs在治療POF的研究中已取得大量成果。

基礎研究二：Bao等發現POI小鼠接受hBM-MSCs治療后，卵巢內各級卵泡數目增加、性激素水平和生育力均可得到恢復。目前更多的學者傾向于hBM-MSCs可向受損卵巢間質組織遷移，但不向卵細胞分化，而是通過旁分泌途徑分泌相關細胞因子改善卵巢間質微環境，促進組織修復。

提示旁分泌途徑在hBM-MSCs治療POF中也發揮了重要作用。

對于hBM-MSCs作用機制的研究還包括：抑制卵巢顆粒細胞凋亡、促進血管生成、減少細胞外基質沉積從而抗卵巢組織纖維化、 抑制炎癥反應以及hBM-MSCs分化為卵巢顆粒樣細胞等。

人胎盤間充質干細胞

目前，對于hPMSCs治療POF的研究表明，hPMSCs主要通過免疫調節而發揮作用。

透明帶3多肽（pZP3）免疫損傷誘導的POF小鼠給予hPMSCs移植后，觀察到卵巢組織內閉鎖卵泡減少， 顆粒細胞凋亡減少，且AMH及FSHR表達均增加。

在機制研究方面，Yin等認為hPMSCs可以通過影響磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）通路、調節輔助性T細胞17/細胞毒T細胞17（Th17/Tc17）與Th17/調節性T細胞（Treg）之間平衡，減少卵泡閉鎖及顆粒細胞凋亡。

干細胞來源的外泌體用于 POI/POF 治療

Huang等發現人脂肪間充質干細胞來源外泌體（hADSC-Exo） 通過上調 Smad2、Smad3、Smad5 表達，抑制Fas、FasL、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 3（caspase-3）、caspase-8 凋亡蛋白表達，從而抑制顆粒細胞凋亡，修復卵巢功能。

在外泌體治療POI的研究中，多種miRNAs發揮了重要作用。

Zhang等研究表明人羊膜上皮細胞來源外泌體（hAECs-Exo）可通過傳遞miR-1246 等多種 miRNAs， 抑制化療藥物引起的卵巢顆粒細胞凋亡。

臨床案例

目前?hBM-MSCs修復卵巢功能的作用已在多種動物模型上得到驗證，在臨床治療中，POF患者通過hBM- MSCs移植后改善內分泌水平、恢復排卵，甚至自然 妊娠并分娩健康嬰兒的臨床案例也已有報道。

在迄今為止發表的3篇研究中，共有41例POF患者，其中接受自體hBM-MSCs移植后有3例成功妊娠。

hUCMSCs對卵巢的修復作用在化療誘導及自然衰老動物模型中均已被報道。

在臨床治療中，Ding等發現hUCMSCs可通過磷酸化FOXO3、FOXO1，激活原始卵泡；將膠原蛋白負載的hUCMSCs移植入長期不孕的POF患者，觀察到 hUCMSCs可促進卵泡生成及活化、增加竇狀卵泡數目，并有1例成功妊娠。

結語與展望

隨著再生醫學的發展，干細胞及其外泌體治療為修復卵巢功能、?恢復生育能力提供了新的希望。

近年來，干細胞旁分泌作用的研究越來越受到關注，并提出了無細胞治療?的生物治療方式。其中干細胞來源外泌體較干細胞免疫排斥幾率更低，?可以避免或減輕移植后異常分化和炎癥相關問題的風險。

外泌體在保持干細胞生物作用的同時，又能規避其缺陷，有望成為POI?的一?種新型治療方法。