干細(xì)胞改善卵巢功能臨床數(shù)據(jù)集錦

干細(xì)胞技術(shù)在再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中占據(jù)重要地位，正在迅速發(fā)展中。最近，許多研究實(shí)驗(yàn)已經(jīng)將干細(xì)胞科技應(yīng)用于治療生殖系統(tǒng)疾病。本文總結(jié)一些臨床實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)結(jié)果，為開發(fā)干細(xì)胞療法以增強(qiáng)卵巢功能提供科學(xué)依據(jù)，僅供參考。

卵巢早衰（POF）引發(fā)的原因很多，比如，遺傳因素、免疫因素、化學(xué)藥物的副作用或外科手術(shù)損傷等。可以根據(jù)卵泡數(shù)量減少，月經(jīng)周期異常和相關(guān)激素分泌水平來診斷。當(dāng)下，卵巢早衰經(jīng)典的治療方法是激素療法。然而，激素替代療法的副作用（例如，高癌癥風(fēng)險(xiǎn)）可能對(duì)許多女性造成新的風(fēng)險(xiǎn)。因此，許多科學(xué)家已經(jīng)嘗試使用基于干細(xì)胞的策略來開發(fā)替代療法，并且取得了很好的效果。

由于臨床前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)文獻(xiàn)量巨大，下面僅以一篇文獻(xiàn)為例：

作者團(tuán)隊(duì)通過注射zona pellucida 3 peptide (pZP3)誘導(dǎo)小鼠卵巢早衰模型，尾靜脈注射胎盤來源的間充質(zhì)干細(xì)胞（hPMSCs）,hPMSC移植可顯著提高POF小鼠的血清促性腺激素和低雌激素水平，促進(jìn)卵泡發(fā)育，抑制過度的卵泡閉鎖和顆粒細(xì)胞凋亡，并提高卵巢儲(chǔ)備能力。該機(jī)制可通過增加 AMH和FSHR在卵巢中的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)。

以下數(shù)據(jù)來源FDA臨床研究注冊(cè)中心，部分相關(guān)的干細(xì)胞治療卵巢早衰的實(shí)驗(yàn)，已經(jīng)完成。

該項(xiàng)目中出生的寶寶“Zeinab”是世界上第一個(gè)通過干細(xì)胞治療卵巢早衰后誕生的寶寶，38周，3.3公斤重。

在這個(gè)項(xiàng)目中，共有10名POF患者在愛資哈爾大學(xué)醫(yī)院接受間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）移植。來自髂嵴骨髓的MSC制劑通過腹腔鏡注射到卵巢中。結(jié)果顯示，移植后2例（20%）3個(gè)月后恢復(fù)月經(jīng)，其中1例（10%）11個(gè)月后懷孕并健康分娩足月嬰兒。移植后10個(gè)月，一名患者的卵巢儲(chǔ)備評(píng)分（EORS）在治療前為0，治療后發(fā)現(xiàn)為7。另一例患者的經(jīng)期EORS治療前為0，治療后為5。2例經(jīng)期子宮內(nèi)膜萎縮后出現(xiàn)局灶性分泌改變。

相關(guān)其他文獻(xiàn)：Gupta S, Lodha P, Karthick MS, Tandulwadkar SR. Role of autologous bone marrow-derived stem cell therapy for follicular recruitment in premature ovarian insufficiency: review of literature and a case report of world’s first baby with ovarian autologous stem cell therapy in a perimenopausal woman of age 45 year. J Human Reprod Sci 2018; 11:125–130.

30名POF患者用G-CSF刺激后，從脊椎吸出60ml骨髓， 并在GMP條件下分離間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）。將分離的MSC注入一側(cè)卵巢。

在注射4周后，有26例患者（86.7％）表現(xiàn)出 FSH水平下降以及雌激素和AMH水平升高，并且這種變化在整個(gè)48周的隨訪期間一直保持。18名患者（60％）排卵，卵子大小在12-20毫米之間。有一名患者自發(fā)妊娠，而三名患者接受了IVF周期治療。這項(xiàng)研究表明自體MSC可以改善POF患者的病情。

自體干細(xì)胞卵巢移植（ASCOT）2周后竇狀卵泡計(jì)數(shù)有明顯改善，提高反應(yīng)較差患者的生殖潛能。以竇狀卵泡計(jì)數(shù)增加三個(gè)或更多卵泡和/或連續(xù)兩次增加抗卵巢激素水平為成功標(biāo)準(zhǔn)，81.3%的婦女卵巢功能得到改善。

這些積極作用與成纖維細(xì)胞生長因子-2和凝血酶原蛋白的存在有關(guān)。在控制性促排卵過程中，自體干細(xì)胞卵巢移植增加了可刺激的有腔卵泡數(shù)和卵母細(xì)胞數(shù)，但胚胎整倍體率較低。共有5例受孕：2例在胚胎移植后，3例通過自然受孕。

同一項(xiàng)目的另一篇文章：

BMDSC（骨髓來源的干細(xì)胞）輸注后，化學(xué)誘導(dǎo)的卵巢早衰的小鼠模型實(shí)現(xiàn)了生育恢復(fù)和自然懷孕。此外，BMDSC治療導(dǎo)致排卵前卵泡，中期II 卵母細(xì)胞，細(xì)胞胚胎和健康幼仔數(shù)量增加。干細(xì)胞促進(jìn)卵巢血管化和細(xì)胞增殖，并減少細(xì)胞凋亡。

該項(xiàng)目是南京鼓樓與戴建武合作開展的臨床實(shí)驗(yàn)。26 例因復(fù)發(fā)性IUA引起的不育癥患者參加了這項(xiàng)前瞻性，非對(duì)照，I期臨床試驗(yàn)，并進(jìn)行了為期 30 個(gè)月的隨訪。

在此過程中，按照粘連分離程序，將 1×10^7 臍帶來源的間充質(zhì)干細(xì)胞（UC-MSC）加載到膠原蛋白支架上，然后移植到子宮腔中。結(jié)果，未發(fā)現(xiàn)與治療有關(guān)的嚴(yán)重不良事件。

術(shù)后三個(gè)月，患者平均最大子宮內(nèi)膜厚度增加，宮腔粘連評(píng)分較治療前降低。組織學(xué)研究顯示 ERα（雌激素受體 α），波形蛋白，Ki67和vWF（von Willebrand因子）表達(dá)水平上調(diào)，而ΔNP63表達(dá)水平下調(diào)，表明治療后子宮內(nèi)膜增生，分化和新血管形成得到改善。DNA短串聯(lián)重復(fù)序列（STR）分析顯示，再生的子宮內(nèi)膜僅包含患者 DNA。截至 30 個(gè)月的隨訪期結(jié)束時(shí)，這26名患者中有10名已懷孕。

10名患者的初步結(jié)果顯示，與基礎(chǔ)水平相比，雙臂的卵泡發(fā)育；這些卵泡生長波是在治療90-140 天后檢測到的。在G-CSF組，50%的入選患者(2/4)AFC增加，而在ASCOT（干細(xì)胞移植）組，66.6%的女性(4/6)檢測到這種改善。FSH水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的下降，但G-CSF組2例(50%)和 ASCOT組1 例(16%)下降2倍，隨訪結(jié)束時(shí)分別為(82.7 ± 8.1)~(24.1 ± 17.4) 和 (34.9~18.1)。G-CSF動(dòng)員后，2/4 婦女啟動(dòng)COS，共4個(gè)穿刺卵泡，2個(gè)MII，1個(gè)胚胎玻璃化冷凍。進(jìn)行了胚胎移植，但沒有懷孕；這名患者目前在隨訪期后有規(guī)律的月經(jīng)。

在 ASCOT（干細(xì)胞移植）組，6 例患者中有4例啟動(dòng)了COS周期。在啟動(dòng)的COS中，70%的患者獲得了卵母細(xì)胞，其中3個(gè)MII和1個(gè)GV被取回。一個(gè)3天的胚胎被玻璃化冷凍并移植，繼續(xù)懷孕(20周)。這些婦女在治療前不能接受COS/卵母細(xì)胞采集，因?yàn)闆]有腔卵泡。在更年期癥狀中，50%的女性潮熱和陰道干燥得到改善，40%的女性月經(jīng)恢復(fù)。

通過以上這些實(shí)驗(yàn)，我們可以明確得知：采用干細(xì)胞移植的方式，可以修復(fù)卵巢，用于治療卵巢早衰安全有效。同時(shí)也可改善更年期癥狀，逆轉(zhuǎn)女性衰老。