Stem Cell Res Ther | 云南省口腔醫學重點實驗室楊禾豐團隊:牙囊干細胞源小囊泡為牙周組織再生提供生化線索

間充質干細胞、免疫細胞、外泌體源頭實驗室

牙周炎是臨床常見的口腔疾病,是引起成年人牙齒喪失的主要原因之一,嚴重影響牙齒甚至全身健康。基于細胞移植的組織工程是目前再生牙周組織的主要策略,研究其再生機制具有重要的科學意義。Small extracellular vesicles(sEVs)作為旁分泌的重要組成已被證實在組織再生中扮演關鍵角色。基于sEVs的無細胞療法可以避免細胞移植帶來的一系列免疫反應,與傳統的細胞移植相比展示出良好的應用前景。越來越多的證據表明sEVs在皮膚組織、骨組織及軟骨再生中均發揮重要的作用,然而在牙周組織再生中的研究還很少。牙囊干細胞(Dental follicle stem cells,DFSCs)作為多種牙周形成組織的前體細胞,促牙周再生功能已明確。其分泌的sEVs(DFSCs-sEVs)在牙周組織修復及牙周膜干細胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)增殖、遷移、成骨分化等方面發揮關鍵調控作用。

近日,云南省口腔醫學重點實驗室楊禾豐博士和昆明醫科大學附屬口腔醫院胡江天教授團隊Stem Cell Research & Therapy雜志上發表了題為“Small extracellular vesicles from dental follicle stem cells providebiochemical cues for periodontal tissue regeneration”(2022;13:92)的研究。該研究表明DFSCs-sEVs通過促進PDLSCs增殖、遷移及成骨向分化從而促進牙周組織再生。DFSCs-sEVs促進PDLSCs增殖的作用可能部分歸因于p38 MAPK信號通路的激活。

Stem Cell Res Ther | 云南省口腔醫學重點實驗室楊禾豐團隊:牙囊干細胞源小囊泡為牙周組織再生提供生化線索
在牙的發育過程中,牙囊干細胞作為多種牙周形成組織的前體細胞,在位置與功能上與牙周膜干細胞聯系緊密,并具備分化形成牙周膜、牙骨質、牙槽骨的能力。該研究團隊前期研究已明確牙囊干細胞促牙周再生功能,然而潛在的機制仍不清楚。sEVs作為細胞間通訊的重要載體,是否是牙囊干細胞促進牙周組織再生的效應成分?
為了解決這一疑問,該研究分離并鑒定DFSCs-sEVs,將DFSCs-sEVs與PDLSCs共培養;通過EdU、CCK-8、細胞周期實驗、劃痕實驗、茜素紅染色、Q-PCR及western blot檢測DFSCs-sEVs對PDLSCs生物學特性的影響;通過轉錄組測序及功能富集分析尋找可能被DFSCs-sEVs激活的信號通路并進一步驗證;將負載有DFSCs-sEVs的膠原膜移植到SD大鼠的牙周缺損部位,通過HE染色和micro-CT評估牙周組織再生情況。

結果顯示,DFSCs-sEVs被PDLSCs攝取后促進了PDLSCs增殖、遷移及礦化結節形成,并上調成骨相關基因(RUNX2, BSP,COL1)和成骨相關蛋白(RUNX2, BSP, COL1, ALP)的表達;進一步探究其機制發現DFSCs-sEVs通過激活p38 MAPK信號通路促進PDLSCs增殖;移植DFSCs-sEVs后,大鼠牙周缺損區可見新牙周膜樣結構和新骨形成,在新形成的牙周膜和缺損區軟組織中觀察到PKH26標記的DFSCs-sEVs。

上述結果展示了DFSCs-sEVs促牙周再生的潛力,為探索無細胞移植技術再生牙周組織提供理論基礎。

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參考文獻:

Small extracellular vesicles from dental follicle stem cells provide biochemical cuesfor periodontal tissue regeneration.?Stem Cell Res Ther. 2022;13(1):92.

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