Nature：CIK治療，細(xì)胞占比決定療效

撰文｜摩西

編輯｜南風(fēng)

1991年一位名叫G.H. Schmidt-Wolf的醫(yī)生首次發(fā)現(xiàn)并命名了CIK細(xì)胞，并將此發(fā)現(xiàn)發(fā)表在《Journal of Experimental Medicine》雜志上。隨后 G.H. Schmidt-Wolf 將他發(fā)現(xiàn)的CIK細(xì)胞用于癌癥臨床研究。

在1999年的一篇文章報(bào)道了G.H. Schmidt-Wolf將白細(xì)胞介素-2誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞用于轉(zhuǎn)移性腎癌、結(jié)直腸癌和淋巴瘤患者的臨床試驗(yàn)。而在此前，CIK細(xì)胞已被證明可以根除嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷（SCID）人類淋巴瘤模型小鼠中的腫瘤。今天，了解免疫細(xì)胞治療技術(shù)的讀者，對(duì)CIK細(xì)胞都不陌生。

細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞 (CIK) 主要是 CD3 + CD56 + T 細(xì)胞，是通過(guò)體外刺激多種細(xì)胞因子從人外周血單個(gè)核細(xì)胞 (PBMC) 中獲得的異質(zhì)細(xì)胞群。這些細(xì)胞像效應(yīng)T細(xì)胞一樣具有很強(qiáng)的抗腫瘤活性，并且像NK細(xì)胞一樣具有強(qiáng)大的MHC非限制性腫瘤殺傷優(yōu)勢(shì)[1]。

CIK細(xì)胞輸注，聯(lián)合DC（樹突狀細(xì)胞）、化療、免疫檢查點(diǎn)抑制劑，在臨床用于治療多種癌癥，尤其在肺癌、血液腫瘤、胃癌等方面取得了較高的臨床療效[2,3,4,5,6]。

作為一種廣泛研究的過(guò)繼治療方法，CIK（細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞）治療在許多非小細(xì)胞肺癌的臨床試驗(yàn)中表現(xiàn)出較好的功效。然而，作為異質(zhì)細(xì)胞群，CIK細(xì)胞具有很強(qiáng)的不穩(wěn)定性和個(gè)體差異，其功效受到腫瘤微環(huán)境和CIK亞群的協(xié)同調(diào)控。

CD3 + T細(xì)胞（80%以上）在CIK細(xì)胞群中占主導(dǎo)地位，其中以CD8 + T細(xì)胞為主，其余為CD4 + T細(xì)胞。其中，CD4 + T細(xì)胞屬于CIK細(xì)胞群的一個(gè)重要亞群，其對(duì)CIK治療的影響尚不清楚。以往有研究證實(shí)，大多數(shù)CD4 + T細(xì)胞有效改善CD8 +細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTLs）的記憶和細(xì)胞毒功能，并通過(guò)在腫瘤微環(huán)境中釋放多種有利的細(xì)胞因子幫助CTLs抑制腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸[8]。

今年在頂級(jí)期刊Nature的子刊Cell Death&Disease上發(fā)表的一項(xiàng)CIK治療NSCLC患者的回顧性臨床研究中，研究者通過(guò)離體擴(kuò)增，發(fā)現(xiàn)在一些患者中，CIK中CD4 + T比例甚至可以占到T細(xì)胞的60%。不同患者的CIK中CD4 + T細(xì)胞的比例存在顯著差異；

研究者推測(cè)不同百分比的CD4 + T 細(xì)胞，將最終決定 CIKs 殺死腫瘤細(xì)胞的能力，隨后他們?cè)O(shè)計(jì)了體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)來(lái)研究 CD4 +的潛在調(diào)節(jié)機(jī)制。

通過(guò)回顧性地收集了之前接受 CIK 治療的 NSCLC 患者的臨床試驗(yàn) (NCT01631357) [10] 信息，總結(jié)出所有參與試驗(yàn)的43名患者的基線臨床病理學(xué)特征。

根據(jù)CIKs人群中CD4 + T細(xì)胞在接受第二次CIK過(guò)繼治療前的百分比，研究者將這些患者平均分為高組（平均值為50.87%）、中組（37.77%）和低組（25.06%），并發(fā)現(xiàn)中間組與其他組相比具有更好的無(wú)進(jìn)展生存期（PFS）和良好的總生存期（OS）趨勢(shì)（下圖A，B）。

A、三個(gè)（高、中、低）組的無(wú)進(jìn)展生存期；B、三個(gè)（高、中、低）組的總生存期。

為了檢測(cè)腫瘤環(huán)境中 CD4 + T 細(xì)胞對(duì) CD4 – CIKs 的影響，研究者在之前的研究的基礎(chǔ)上制作了一個(gè)體外共培養(yǎng) CIKs 和腫瘤細(xì)胞（A549 或 H520）的模型 [14]。

從含有 CD4 + T 細(xì)胞的共培養(yǎng)系統(tǒng)中收集上清液，并用它們來(lái)刺激 CD4 – CIK。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，由 CD4 + T 細(xì)胞上清液（SCD4 – CIK）刺激的 CD4 – CIK 具有更強(qiáng)的細(xì)胞因子分泌能力。

在腫瘤組織中，CD4 – CIK 組的 CD8 + T 細(xì)胞數(shù)量較少，并且在腫瘤組織中的細(xì)胞毒功能比CIK組差（圖H）。這些結(jié)果表明，CD4 + T 細(xì)胞可能參與調(diào)節(jié)腫瘤浸潤(rùn)性CIK的募集和功能。

上述整個(gè)的臨床預(yù)后結(jié)果已經(jīng)暗示，血液中CD4 + T細(xì)胞比例低的患者CIK治療的臨床療效較差。鑒于此，研究者提出假設(shè)，提高這些患者的治療效果，聯(lián)合治療可能是一種可行的治療策略。

為了論證聯(lián)合用藥的治療效果，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，研究團(tuán)隊(duì)加入IL-17A 或抗 PD-1 聯(lián)合治療。隨后分析了CD4 – CIKs浸潤(rùn)的數(shù)量、功能和耗竭，發(fā)現(xiàn)CD3 + CD56 + T細(xì)胞浸潤(rùn)數(shù)量明顯增加，PD-1 + Tim-3 + T細(xì)胞明顯減少，而干擾素-γ+ GzmB +CD4 – CIK+rIL-17A組T細(xì)胞明顯增多。這些結(jié)果表明，外源性 rIL-17A 可以恢復(fù)腫瘤組織中 PD-1 + Tim-3 + CIKs 的功能衰竭，逆轉(zhuǎn)了疲憊的CIKs的功能。

總之，此項(xiàng)研究表明，CIK 細(xì)胞中不同亞群的比例不同，最終影響腫瘤治療的功效。?其中CD4 + T 細(xì)胞被證明可有效逆轉(zhuǎn) CIK 細(xì)胞浸潤(rùn) NSCLC 的功能衰竭，并通過(guò) IL-17/AKT/T-bet 軸恢復(fù) CIK 細(xì)胞的細(xì)胞毒性。

此外，CIK 聯(lián)合抗 PD-1 治療被證明是一種可行的聯(lián)合治療方法，可促進(jìn) CIK 細(xì)胞的抗腫瘤反應(yīng)并抑制腫瘤進(jìn)展，特別是對(duì)于功能失調(diào)和 CD4 +比例低的 NSCLC 患者外周血中的T細(xì)胞。

這些發(fā)現(xiàn)為臨床篩選適合CIK治療的患者提供了實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)，也為CIK治療在包括NSCLC在內(nèi)的實(shí)體瘤中的應(yīng)用提出了一種新的聯(lián)合治療方法。

參考資料：

CD4+?T cells are required to improve the efficacy of CIK therapy in non-small cell lung cancer.Cell Death & Disease?.13, Article?number:?441?(2022)volume?13, Article?number:?441?(2022)