再生醫(yī)學(xué)是美容醫(yī)學(xué)的五大發(fā)展技術(shù)之一。其技術(shù)發(fā)展的三大要素是細(xì)胞療法、細(xì)胞因子療法和細(xì)胞外基質(zhì)療法。細(xì)胞療法是再生醫(yī)學(xué)的核心,而干細(xì)胞療法是再生醫(yī)學(xué)核心的核心。細(xì)胞因子是具有免疫調(diào)節(jié)和效應(yīng)功能的低分子量蛋白質(zhì)或稱小分子多肽,其在再生醫(yī)學(xué)中的作用與功能較復(fù)雜,種類繁多,且機(jī)制也更加多樣性,在人體整個(gè)生命活動(dòng)中有更多的未知數(shù)和可能性。
美容醫(yī)學(xué)學(xué)科的兩大任務(wù)是“美容與長(zhǎng)壽”。三大發(fā)展原則是安全有效、微創(chuàng)與無(wú)創(chuàng)和綜合療法。再生醫(yī)學(xué)的五大技術(shù)包括常規(guī)技術(shù)、微創(chuàng)與無(wú)創(chuàng)技術(shù)、再生醫(yī)學(xué)、抗衰老醫(yī)學(xué)和量子順勢(shì)醫(yī)學(xué)。其技術(shù)發(fā)展的核心是再生醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展。再生醫(yī)學(xué)技術(shù)發(fā)展的三大要素是細(xì)胞療法、細(xì)胞因子療法和 細(xì)胞外基質(zhì)療法。然而細(xì)胞療法是再生醫(yī)學(xué)的核心,而干細(xì)胞療法是再生醫(yī)學(xué)核心的核心。
(3D模擬細(xì)胞因子分泌圖)
1 何謂細(xì)胞因子?
細(xì)胞因子(cytokine)是一類能在細(xì)胞間傳遞信息,具有免疫調(diào)節(jié)和效應(yīng)功能的低分子量蛋白質(zhì)或小分子多肽,其在體內(nèi)含量甚微,因其是免疫原、絲裂原或其他刺激劑,可誘導(dǎo)多種細(xì)胞產(chǎn)生低分子量的可溶性蛋白(多肽),具有調(diào)節(jié)固有免疫和適應(yīng)性免疫,促進(jìn)血細(xì)胞生成和生長(zhǎng)以及損傷組織修復(fù)等功能。細(xì)胞因子可分為外泌體(Exosomes)、白細(xì)胞介素(interleukin,IL)、干擾素(interferon,IFN)、腫瘤壞死因子(tumornecrosis factor,TNF)、集落刺激因子(colony stimulating factor,CSF)、生長(zhǎng)因子、趨化性細(xì)胞因子等。
眾多的細(xì)胞因子在體內(nèi)通過(guò)旁分泌、 自分泌或內(nèi)分泌等方式發(fā)揮作用,同時(shí)具有多效性、重疊性、 拮抗性、協(xié)同性等多種生理特性,從而形成較復(fù)雜的細(xì)胞因 子調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò),參與人體多種重要的生理功能。
細(xì)胞因子是由 機(jī)體多種細(xì)胞分泌的小分子蛋白質(zhì)形成,并通過(guò)結(jié)合細(xì)胞表 面的相應(yīng)受體而發(fā)揮生物學(xué)作用。如此細(xì)胞因子被稱為單核 因子(monokine)、淋巴細(xì)胞因子(1ymphokine)、CSF等。由不同 細(xì)胞分泌不同的細(xì)胞因子,如IL、IFN、TNF、生長(zhǎng)因子和趨化 性細(xì)胞因子等均屬血細(xì)胞因子,共有100余種以上,其中部分已應(yīng)用于臨床和美容醫(yī)學(xué)臨床。
2 細(xì)胞因子的種類、作用與功能?
2.1種類
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(1)IL。1979年,在第2屆淋巴因子的國(guó)際會(huì)議上,將介導(dǎo)細(xì)胞問(wèn)相互作用的一些細(xì)胞稱為IL,迄今已知有18種以上參與了相互介導(dǎo)作用。該介素是由淋巴細(xì)胞、單核 細(xì)胞或其他非單核細(xì)胞所產(chǎn)生的細(xì)胞因子。與美容相關(guān)的因子主要有IL一1,IL一2和IL一6。
(2)CSF。對(duì)CSF的研究始于20世紀(jì)60年代。在對(duì)造血細(xì)胞體外研究中發(fā)現(xiàn),一些細(xì)胞因子刺激造血干細(xì)胞在半固體培養(yǎng)液中形成細(xì)胞集落,這類因 子被稱為CSF。從廣義上認(rèn)知,凡是刺激造血細(xì)胞的因子都可稱為CSF,而刺激造血干細(xì)胞因子和胚胎干細(xì)胞的白血病 抑制因子等均有集落刺激活性。
(3)IFN。早在1957年,科學(xué)家Lssacs 等最先發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子是由病毒感染的細(xì)胞產(chǎn)生的一種因子,可抵抗病毒及干擾病毒的復(fù)制,稱為IFN。其是由白細(xì)胞、 纖維母細(xì)胞和活化的T細(xì)胞產(chǎn)生。根據(jù)其來(lái)源和結(jié)構(gòu)可分為 IFN—Ot、IFN—B、IFN一1等十余種不同的亞型,其生物活性 基本相同,除抗病毒外,尚有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫機(jī)制、控制細(xì)胞增殖及引起發(fā)熱等作用。IFN于1991年在中國(guó)已通過(guò)新藥 評(píng)審,且在臨床中得到廣泛應(yīng)用。
(4)TNF。TNF是直接引起細(xì) 胞壞死的細(xì)胞因子,根據(jù)其來(lái)源和結(jié)構(gòu)分為TNF—OI.和 TNF—B,前者是由單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生,后者是由活化的T細(xì) 胞產(chǎn)生,又名為淋巴毒素(1ymphotoxin)。TNF除有殺死腫瘤細(xì) 胞的作用外,尚可引起發(fā)熱和炎癥反應(yīng)。大劑量應(yīng)用TNF一僅 可引起惡病質(zhì)發(fā)生,并引起患者進(jìn)行性消瘦,又稱為惡病質(zhì)素。
(5)淋巴因子(1ymphokine)。由活化的淋巴細(xì)胞產(chǎn)生白細(xì)胞因 子,稱為淋巴因子。如白細(xì)胞介素2~13、TNF—p、IFN一^y等。
(6)單核因子monacine)。由單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子,如 IL一1、6、8,TNF一旺,IFN一僅等。(7)非淋巴細(xì)胞。是由非單核巨 噬細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子,主要由基質(zhì)細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞和 成纖維細(xì)胞產(chǎn)生,如EPO、IL一11、SCF和內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的 IL一8和IFL—B等。
(8)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子一B家族。其有多種細(xì)胞 分泌,主要有TGF—B 1、TGF—p 2、TGF—p 3,以及骨形成蛋白 等。
(9)生長(zhǎng)因子。生長(zhǎng)因子包括表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、血小板 衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)、干細(xì)胞 生長(zhǎng)因子(HGF)、胰島素樣生長(zhǎng)因子一1(TGF—I)、IGF一1I、 白血病抑制因子(LIF)、神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)、抑瘤素M (OSM)、血小板衍生的內(nèi)皮細(xì)胞因子(PDFCGF)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因 子一僅(TGF一Ⅸ)、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)等。㈣趨化 因子家族(chemokine family),包括4個(gè)亞組。
2.2細(xì)胞因子的特點(diǎn)、作用與功能
目前研究發(fā)現(xiàn),正式命名的細(xì)胞因子有數(shù)十種以上,且每種細(xì)胞因子的數(shù)量甚少, 但均具有主要的生物學(xué)活性。其共同特點(diǎn):
(1)天然的細(xì)胞因 子分為靜態(tài)或休眠,必須激活后才能合成或分泌細(xì)胞因子, 它是由抗原、絲裂原或其他刺激物激活免疫細(xì)胞和相關(guān)的其 他細(xì)胞;也有細(xì)胞無(wú)須外源激活化細(xì)胞因子。
(2)具有多向性 和靶向性。一種細(xì)胞產(chǎn)生多種細(xì)胞因子,一種細(xì)胞因子由多 種細(xì)胞產(chǎn)生,且作用于不同的靶細(xì)胞。
(3)即時(shí)性。即細(xì)胞隨時(shí)合成和分泌細(xì)胞因子,隨時(shí)發(fā)揮其生物學(xué)的作用;細(xì)胞因子 極少儲(chǔ)存。
(4)對(duì)靶細(xì)胞作用的強(qiáng)度取決于細(xì)胞因子的局部濃度和靶細(xì)胞類型。
(5)細(xì)胞因子在局部產(chǎn)生,且在局部發(fā)揮 作用。
(6)具有相互調(diào)節(jié),相互調(diào)控和相互協(xié)同的作用。
(7)主要 參與免疫和炎癥反應(yīng),并影響反應(yīng)的強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)問(wèn)。
(8)不同細(xì)胞因子在結(jié)構(gòu)上有很大差異,一般多數(shù)細(xì)胞因子為小分子多肽,多由約100個(gè)氨基酸組成,無(wú)明顯的氨基酸序列的同源性,其分子量不超過(guò)60KD。小分子多肽是一類能在細(xì)胞間傳遞信息,具有免疫調(diào) 節(jié)功能,由10-50個(gè)氨基酸組成。多肽細(xì)胞因子主要有控 制人體生長(zhǎng)、發(fā)育,免疫調(diào)節(jié)和促進(jìn)新陳代謝的平衡作用;可100%被人體吸收,而且不易被各種酶所破壞并優(yōu)先吸收, 不需要消化。如果多肽細(xì)胞因子減少,可使兒童的生長(zhǎng)、發(fā)育變得緩慢,甚至停止,形成侏儒癥;如果成人或老年人的多肽 細(xì)胞因子減少,可使自身的免疫力下降,代謝紊亂,內(nèi)分泌失調(diào),并可引起各種疾病,使自身全面衰老,甚至過(guò)早衰老等。
3 細(xì)胞因子受體?
細(xì)胞因子發(fā)揮再生作用,主要是通過(guò)與靶細(xì)胞表面高親和力的特異性受體結(jié)合后而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng),或稱細(xì)胞表面可特異性識(shí)別細(xì)胞因子,與之結(jié)合后對(duì)細(xì)胞間產(chǎn)生相互作用, 是增加細(xì)胞分化等生物學(xué)功能的特殊蛋白質(zhì),被稱為細(xì)胞因 子受體。其細(xì)胞受體由膜外區(qū)(細(xì)胞因子組合區(qū))、跨膜區(qū)(疏 水性氨基酸區(qū))和膜內(nèi)區(qū)(信號(hào)傳導(dǎo)區(qū))3個(gè)功能區(qū)組成。受體 水平存在相似性(共享鏈),通過(guò)使用其共同的信號(hào)傳導(dǎo)途徑 而發(fā)揮類似的生物學(xué)效應(yīng)。根據(jù)受體膜外區(qū)氨基酸序列,將其 分為3個(gè)受體家族:免疫球蛋白超家族造血生長(zhǎng)因子受體家 族(HPR)、神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體超家族Ig家族和干擾素受體超 家族等。在自然狀態(tài)下,細(xì)胞因子受體主要以膜結(jié)合細(xì)胞因子 受體并存在于血清等體液中,是可溶性細(xì)胞因子受。
4 細(xì)胞因子的生物學(xué)活性?
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4.1 免疫細(xì)胞之間錯(cuò)綜復(fù)雜的調(diào)節(jié)關(guān)系細(xì)胞因子是傳遞 這種調(diào)節(jié)信號(hào)不可少的信息分子。其通過(guò)研究細(xì)胞因子的免疫網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié),可以更好地理解人體完整的免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)機(jī)制,有助于指導(dǎo)細(xì)胞因子作為生物應(yīng)答調(diào)節(jié)而應(yīng)用于臨床免 疫性疾病的治療。
4.2 免疫效應(yīng)分子免疫細(xì)胞在針對(duì)抗原(特別是細(xì)胞抗 原)行使免疫應(yīng)用功能時(shí),免疫效應(yīng)分子是其中的重要效應(yīng) 分子之一。與抗體和補(bǔ)體等其他免疫效應(yīng)分子相比,細(xì)胞因子的免疫效應(yīng)在抗腫瘤細(xì)胞內(nèi)寄生、感染、移植排斥等功能 中發(fā)揮著主要作用。
4.3 造血細(xì)胞刺激劑 從多能造血干細(xì)胞到成熟免疫細(xì)胞的分化發(fā)育中,幾乎每一階段都需要有細(xì)胞因子的參與。在培養(yǎng)基中,造血干細(xì)胞的分化增強(qiáng)產(chǎn)生了大量的子代細(xì)胞,由于其不能擴(kuò)散而形成細(xì)胞簇,稱之為集落。這些子代細(xì)胞不僅 刺激造血干細(xì)胞的細(xì)胞因子,而且刺激著集落的數(shù)量和大小,被稱為CSF。目前,多種刺激造血細(xì)胞因子被廣泛應(yīng)用于臨床血液病的治療,有著非常好的發(fā)展前景。
4.4 炎癥反應(yīng)的促進(jìn)劑炎癥是機(jī)體對(duì)外來(lái)刺激產(chǎn)生的一 種病理反應(yīng)過(guò)程,其表現(xiàn)為局部紅、腫、熱、痛癥狀。在組織病理學(xué)中檢查發(fā)現(xiàn),大量的炎性細(xì)胞和炎性細(xì)胞聚集活化以及炎癥介質(zhì)的釋放,可直接刺激發(fā)熱中樞而引起全身發(fā)燒。目前,利用細(xì)胞因子來(lái)抑制治療炎癥性疾病,臨床中已獲得初步的療效。
5 細(xì)胞因子與疾病?
在病理狀態(tài)下,細(xì)胞因子會(huì)出現(xiàn)異常性表達(dá),表現(xiàn)為細(xì) 胞因子及其受體的缺陷,而細(xì)胞因子表達(dá)過(guò)高,會(huì)使可溶性 細(xì)胞因子受體的水平增加。
5.1 細(xì)胞因子及其受體缺陷包括先天性缺陷和繼發(fā)性缺 陷陽(yáng),表現(xiàn)為液體免疫和細(xì)胞免疫的雙重缺陷,可使患者的 免疫功能嚴(yán)重受損,從而導(dǎo)致感染、腫瘤等發(fā)生。由于免疫功 能全面下降,可表現(xiàn)出獲得性免疫缺陷綜合征的系列癥狀。
5.2 細(xì)胞因子過(guò)高表達(dá)在患有炎癥、自身免疫、變態(tài)反應(yīng) 等疾病時(shí),因某些細(xì)胞因子的表達(dá)量成百上千倍增加,促進(jìn) 了炎癥過(guò)程,從而使病癥加重,故可采用細(xì)胞因子抑制劑來(lái) 治療細(xì)胞因子水平升高性疾病。
5.3 可溶性細(xì)胞因子受體水平升高 由于細(xì)胞膜表面的細(xì)胞因子受體膜脫落,使其成為可溶性細(xì)胞因子受體而存在于體液和血清中。當(dāng)在某些疾病發(fā)生時(shí),會(huì)出現(xiàn)可溶性細(xì)胞因子受體水平升高,以及結(jié)合細(xì)胞因子增加,細(xì)胞因子不再與膜表 面的細(xì)胞因子受體結(jié)合,實(shí)際上是封閉了細(xì)胞因子的功能。
6 細(xì)胞因子的治療?
目前,利用基因工程技術(shù)產(chǎn)生重組的細(xì)胞因子作為生物應(yīng)答調(diào)節(jié)劑,已用于臨床治療腫瘤、感染、造血功能障礙等, 并獲得了較好的療效。細(xì)胞因子已成為新一代的治療藥物, 其低劑量即可發(fā)揮藥效作用,且不良反應(yīng)較輕,是一種全新的生物制劑,也是對(duì)一些疑難雜癥不可缺少的治療手段。目前已獲批準(zhǔn)的藥物有干擾素d、p、1、£,PO,GM—CSF, G—CSF,IL一3;臨床試驗(yàn)的藥物有IL一1、3、4、6、11,M—CSF, SCF,TGF一13等。其通過(guò)各種途徑而使體內(nèi)細(xì)胞因子水平增加,達(dá)到治療疾病的目的。臨床治療效果較好的有IFN、IL一2、 TNF、CSF。細(xì)胞因子阻斷和拮抗療法是抑制細(xì)胞因子的產(chǎn)生 和阻斷細(xì)胞因子與其受體結(jié)合,以及受體后信號(hào)的傳導(dǎo)過(guò) 程,使細(xì)胞因子的病理性作用難以發(fā)揮。
7 細(xì)胞因子的檢測(cè)?
對(duì)細(xì)胞因子的檢測(cè)不僅是基礎(chǔ)免疫研究的有效手段,同時(shí)在臨床對(duì)疾病診斷、療效判斷及細(xì)胞因子治療檢測(cè)方面具 有重要價(jià)值。但是,由于細(xì)胞因子在體內(nèi)的含量甚微,對(duì)細(xì)胞 因子檢測(cè)的實(shí)施較為困難,而且采用不同方法所得的結(jié)果差 異也較大,其準(zhǔn)確性難以判斷。目前檢測(cè)方法有:
(1)生物學(xué)檢測(cè)法。包括細(xì)胞增殖法、靶細(xì)胞殺傷法、細(xì)胞因子誘導(dǎo)的 產(chǎn)品分析法和細(xì)胞病變抑制法。(2)免疫學(xué)檢測(cè)法。(3)分子生 物學(xué)方法。以上檢測(cè)方法,各有其優(yōu)缺點(diǎn)。生物學(xué)檢測(cè)法為常 用方法,比較敏感、可靠,但檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng),步驟繁多,不易掌 握;免疫學(xué)檢測(cè)法較簡(jiǎn)單、迅速,且敏感度低于生物學(xué)檢測(cè);分子生物學(xué)檢測(cè)法是檢測(cè)基因的表達(dá),主要用于對(duì)機(jī)制的探討。
8 細(xì)胞因子與美容醫(yī)學(xué)
皮膚生長(zhǎng)期一般在25歲左右就結(jié)束了,也就是說(shuō)25歲是年輕肌膚與老化肌膚的分水嶺,之后生長(zhǎng)與老化是同時(shí)進(jìn)行的。人體內(nèi)細(xì)胞因子的自然生理含量極少,由于其生理功 能和生物學(xué)效應(yīng)貫穿于人體生長(zhǎng)發(fā)育的全過(guò)程,故其扮演著 重要角色。當(dāng)前,細(xì)胞因子是醫(yī)療美容市場(chǎng)應(yīng)用較廣泛的物質(zhì)之一,但醫(yī)療美容工作者和求美者對(duì)細(xì)胞因子用于美麗和年輕的作用機(jī)制認(rèn)知甚少。目前應(yīng)用生物美容的生長(zhǎng)細(xì)胞因子有EGF、FGF、KGF,以及其他細(xì)胞因子(VEGF、hGF、IGF-1)。
(1)EGF。于1962年由Montalcini和Cohen發(fā)現(xiàn),并于1986年獲得了諾貝爾獎(jiǎng),從此揭開(kāi)了皮膚衰老之謎。因其 能促使皮膚的年輕化,故被稱為“美麗因子”。主要作用是調(diào) 節(jié)表皮與上皮細(xì)胞生長(zhǎng)及分化增殖,促進(jìn)毛細(xì)血管生長(zhǎng),改 善細(xì)胞微環(huán)境,從而保持細(xì)胞的活性等。
(2)FGF。包括酸性 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(aFGF)和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因 子(bFGF)。這兩種細(xì)胞因子均能促進(jìn)成纖維細(xì)胞生長(zhǎng),提高 皮膚合成膠原蛋白的功能,從本質(zhì)上改善了皮膚的狀況。其 主要作用是修復(fù)損傷、去皺、美白、祛斑、防粉刺等。
(3)KGF。該生長(zhǎng)因子屬于FGF家族。由間充質(zhì)細(xì)胞分泌,并通過(guò)旁分 泌途徑來(lái)刺激上皮細(xì)胞增殖,促進(jìn)且維持人角化細(xì)胞、表皮 細(xì)胞及上皮細(xì)胞的增殖、遷移分化和存活等,并能促使皮膚 毛囊、皮脂腺前體細(xì)胞增強(qiáng)和分化,激發(fā)頭皮毛囊的發(fā)育,預(yù) 示生發(fā)的潛在應(yīng)用。
(4)其他。VEGF能促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖 及血管生成,增加血管通透性,對(duì)改善皮膚微環(huán)境循環(huán)并增 強(qiáng)皮膚細(xì)胞的合成代謝起著重要作用;hGF是由人腦垂體 前葉分泌的。自1985年羅德曼將hGF應(yīng)用于臨床30余年 來(lái)的研究表明,IGF—l、腦垂體前葉分泌一1的hGH能獨(dú)立 存在2—4 min,并由肝臟迅速轉(zhuǎn)化為IGF一1在體內(nèi)發(fā)揮作 用。IGF一1與PDGF有協(xié)同作用,能增加表皮和內(nèi)皮的再生。
健康與疾病,或美麗與年輕都是由綜合因素形成的,而細(xì)胞因子僅是綜合因素之一。由此可見(jiàn),對(duì)于綜合問(wèn)題必須要用解決綜合問(wèn)題的方法,因其是客觀現(xiàn)實(shí)與真理。
9 存在問(wèn)題?
由于細(xì)胞因子屬細(xì)胞活性成分,且易失活和降解,因此對(duì)溫度及光照射pH值均有嚴(yán)格的要求。目前,細(xì)胞因子的應(yīng)用仍存在一些需要解決的問(wèn)題:
(1)半衰期短,穩(wěn)定性較差。hGH血中半衰期僅為17~45 min,與其性特征不能滿足應(yīng)用 hGH的需求。
(2)透皮吸收方式亟待解決。對(duì)于透皮吸收細(xì)胞因子的臨床應(yīng)用,一直是一項(xiàng)影響療效和存在不良反應(yīng)的難題。目前,納米技術(shù)及量子醫(yī)學(xué)技術(shù)的應(yīng)用正在實(shí)驗(yàn)研究和臨床驗(yàn)證中。
(3)使用劑量難于把握。細(xì)胞因子在人體內(nèi)含量極微,因此在局部應(yīng)用的劑量較難掌握。目前,國(guó)內(nèi)外正在 通過(guò)試驗(yàn)研究對(duì)順勢(shì)醫(yī)學(xué)的無(wú)窮小劑量原理進(jìn)行臨床驗(yàn)證。
(4)治療技術(shù)單一,效果不理想。健康和疾病的原理均是整 體性、綜合性的。因此,人類必須更新對(duì)健康和疾病整體性、 綜合性等原理的認(rèn)知。
(5)潛在風(fēng)險(xiǎn)。細(xì)胞因子在臨床應(yīng)用中, 由于無(wú)限再生、瘤化、致癌等一系列問(wèn)題出現(xiàn),已成為當(dāng)今人 類必須面對(duì)且需要解決的問(wèn)題。21世紀(jì)是生命科學(xué)的世紀(jì),核心是再生醫(yī)學(xué)問(wèn)題,而細(xì)胞因子是再生醫(yī)學(xué)的三大要素之一。如此,細(xì)胞因子是當(dāng)今重大且需面對(duì)的問(wèn)題,需要引起人類對(duì)細(xì)胞因子理論和臨床應(yīng)用進(jìn)行深入研究。
參考文獻(xiàn)《中國(guó)整形美容外科雜志》細(xì)胞因子與再生醫(yī)學(xué)
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