21名女性雙盲試驗：證明外泌體的皮膚增白功效 | Cosmetics

臨床研究是根據(jù)赫爾辛基宣言和韓國皮膚病研究所（KDRI）的良好臨床實踐 (GCP) 指南進行的。

21名年齡在 39-55 歲之間、患有色素沉著過度的女性志愿者參與了這項研究。所有志愿者都被告知研究的細(xì)節(jié)，并簽署了經(jīng) KDRI 機構(gòu)審查委員會批準(zhǔn)的知情同意書。

雙盲試驗本質(zhì)上只是一個科研方法。它是一個廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥領(lǐng)域和其他科學(xué)、社會學(xué)領(lǐng)域的一個科研方法。

對藥品實驗來說，雙盲的含義指的是參與科研的醫(yī)生不知道哪一組是實驗組，哪一組是對照組。同時參與實驗的受試者也不知道自己是屬于哪一組。

研究表明，干細(xì)胞及其衍生物，包括條件培養(yǎng)基（CM），對皮膚色素沉著具有抑制作用。然而，缺乏支持干細(xì)胞來源的外泌體美白效果的證據(jù)。

外泌體包含各種貨物，包括蛋白質(zhì)、RNA 和脂質(zhì)。ExoCarta 數(shù)據(jù)庫中注冊的 286 項研究表明，外泌體貨物的復(fù)雜性包括 9769 種蛋白質(zhì)、3408 種 mRNA、2838 種 miRNA 和1116種脂質(zhì)。這些貨物分子有助于外泌體在各種生物過程中的功能。

韓國ExoCoBio 外泌體研究所、韓國中央大學(xué)醫(yī)學(xué)院皮膚科和美國關(guān)島皮膚病研究所的科研人員研究了源自人間充質(zhì)干細(xì)胞來源的外泌體的體外抗色素沉著作用和體內(nèi)亮膚功效。相關(guān)研究成果發(fā)表在國際學(xué)術(shù)期刊Cosmetics上（下圖）。

在該研究中，研究人員使用切向流過濾方法分離出外泌體。最終研究發(fā)現(xiàn)無論是否存在 α-促黑素細(xì)胞激素 (α-MSH)，外泌體都能降低 B16F10 黑色素瘤細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)黑色素水平。

在這項前瞻性、分臉、雙盲、隨機安慰劑對照研究。與安慰劑對照相比，含外泌體的制劑在統(tǒng)計學(xué)上降低了黑色素含量。

然而，黑色素減少活動是有限的，并且會隨著時間的推移而減弱。進一步改進外泌體的有效透皮遞送方式將有助于獲得更深遠(yuǎn)的療效?？傊?，這些結(jié)果表明外泌體可用作美白皮膚的藥妝品。

色素沉著過度或黑色素沉著癥

該研究報告指出，色素沉著過度或黑色素沉著癥是一種皮膚病，由黑色素在皮膚中過度積累引起，使皮膚不美觀。

臨床上，色素沉著過度障礙包括日光性雀斑、炎癥后色素沉著過度、黃褐斑、雀斑和牛奶咖啡斑，具有不同的病理和黑素細(xì)胞受累。

它的特點是在臉頰、上唇、下巴和前額處出現(xiàn)較深的斑塊。許多美白劑，如曲酸、氫醌、維甲酸和維生素 C，已被廣泛用作局部治療，但療效有限和副作用較多。

雖然色素沉著過度不是危及生命的皮膚病，但它具有心理社會影響，可能會降低女性和男性的生活質(zhì)量。治療色素沉著過度仍然具有挑戰(zhàn)性，因此對安全有效的皮膚美白替代品的需求尚未得到滿足。

先前的研究報告稱，干細(xì)胞條件培養(yǎng)基 (CM)，主要來自間充質(zhì)干細(xì)胞 (MSC) 培養(yǎng)物，對皮膚具有抗衰老、抗皺和抗色素沉著等有益作用。

MSC 條件培養(yǎng)基 (MSC-CM) 中的分泌蛋白組含有可溶性蛋白質(zhì)和細(xì)胞外囊泡 (EV)，包括外泌體。由于質(zhì)膜和包含腔內(nèi)囊泡 (ILV) 的多泡體融合，細(xì)胞通過內(nèi)體途徑產(chǎn)生外泌體 。

外泌體在細(xì)胞外空間釋放，它們被包裹在直徑為 30–200 nm 的脂質(zhì)雙層中，并含有蛋白質(zhì)、信使 RNA (mRNA) 和微小 RNA (miRNA) 等遺傳物質(zhì)以及代謝物。

源自 MSC 的外泌體（MSC-外泌體）主要介導(dǎo) MSC 治療的旁分泌作用，是一種很有前途的下一代無細(xì)胞治療選擇。MSC-外泌體具有使皮膚再生或恢復(fù)活力的潛力。

具體而言，源自MSC 的外泌體可通過皮膚屏障修復(fù)和抗炎作用降低特應(yīng)性皮炎的嚴(yán)重程度 。

外泌體也被證明可以在體外誘導(dǎo)人真皮成纖維細(xì)胞中 I 型膠原蛋白和彈性蛋白的合成。

盡管源自角質(zhì)形成細(xì)胞的外泌體可調(diào)節(jié)黑色素生成的穩(wěn)態(tài)，但缺乏支持 MSC 外泌體美白效果的證據(jù)。

在這份報告中，研究人員在一項前瞻性、分面、雙盲、隨機安慰劑對照研究中揭示了外泌體的體外抗色素沉著作用和含外泌體制劑的體內(nèi)亮膚作用。

臨床評估

臨床研究是根據(jù)赫爾辛基宣言和韓國皮膚病研究所（KDRI）的良好臨床實踐 (GCP) 指南進行的。

根據(jù)韓國 MFDS 關(guān)于功能性評估的規(guī)定和相關(guān)指南，該研究被設(shè)計和實施為一項為期 8 周的前瞻性、分面、雙盲、隨機安慰劑對照研究。

21 名年齡在 39-55 歲之間、患有色素沉著過度的女性志愿者參與了這項研究。所有志愿者都被告知研究的細(xì)節(jié)，并簽署了經(jīng) KDRI 機構(gòu)審查委員會批準(zhǔn)的知情同意書（批準(zhǔn)號：KDRI-IRB-19599）。

排除標(biāo)準(zhǔn)包括懷孕或哺乳、光過敏或光敏、>1 個月使用含類固醇的乳膏、敏感性或過敏性皮膚，最近 6 個月內(nèi)參加過類似研究，測試區(qū)域有皮膚異常，如斑點、痤瘡、紅斑和毛細(xì)血管擴張，最近 3 個月內(nèi)使用過相同或相似的產(chǎn)品，并且積極使用用于美白皮膚的食品或藥物。大約 0.2 g 的安慰劑（不含 ASC-外泌體）或測試制劑（含 ASC-外泌體）每天兩次，持續(xù) 8 周。

在治療前和治療后 2、4 和 8 周進行皮膚評估。評價前，志愿者用洗面奶洗臉，用紙巾擦去殘留水分。所有志愿者必須在 20–24°C 和 40–60% 相對濕度的受控環(huán)境中休息 30 分鐘。黑色素水平使用 Mexameter (Courage + Khazaka Electronic GmbH, K?ln, 德國）。五次測量的平均值用于確定改善率 (%)，計算如下：((治療前值) ? (治療后值))/(治療前值) × 100。

外泌體的亮膚功效

這項前瞻性、分面、雙盲、隨機安慰劑對照研究中對含有 外泌體的制劑進行了臨床研究，以評估其亮膚功效。

安慰劑（不含 ASC-外泌體）或試驗（含外泌體）制劑每天兩次應(yīng)用于 21 名女性志愿者的面部，持續(xù) 8 周。

在治療前和治療后 2、4 和 8 周使用 Mexameter 測量黑色素水平。黑色素水平在治療后 2 周開始減少，與安慰劑治療區(qū)域相比，在治療 4 周后觀察到具有統(tǒng)計學(xué)意義的減少（圖1)。

然而，黑色素減少活性隨著時間的推移而減弱（在第 8 周）。如治療后 4 周觀察到的，年齡

圖1：ASC-外泌體美白效果的臨床評價。在使用安慰劑（不含外泌體）或測試（含外泌體）制劑治療前和治療后 2、4 和 8 周，使用 Mexameter 測量 21 名女性志愿者的面部黑色素水平，每天兩次，持續(xù) 8 周。( A ) 隨著時間的推移黑色素減少。( B ) 不同年齡組的黑色素減少。n = 11 表示 40 秒，n = 8 表示 50 秒。* p

表 1.?每個志愿者的黑色素指數(shù)。

總結(jié)與展望

亮膚化妝品有助于改善膚色并減少皮膚色素沉著。它們越來越多地被用于獲得均勻的膚色、減輕瑕疵和減少老年斑。

到 2025 年，美白產(chǎn)品的全球市場價值預(yù)計將達(dá)到 137 億美元，并且在預(yù)測期內(nèi)以 7.4% 的復(fù)合年增長率增長。

這種積極的趨勢是因為消費者對現(xiàn)代社會的審美需求、皮膚色素沉著和衰老的認(rèn)識不斷提高。

黑色素沉積是由紫外線 (UV) 輻射引起的；它保護皮膚免受紫外線傷害。然而，黑色素細(xì)胞的過度活化會導(dǎo)致皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞的色素沉著。

因此，減少黑色素水平對于皮膚增白是必要的。黑色素細(xì)胞位于表皮基底層，含有黑色素體；它們通過黑素生成合成色素黑色素。

在這項研究中，研究人員發(fā)現(xiàn)外泌體都能降低細(xì)胞內(nèi)黑色素水平，而沒有顯著的細(xì)胞毒性，外泌體的局部制劑減少了色素沉著過度。

治療 2 周，注意到測試治療區(qū)域和安慰劑對照區(qū)域之間黑色素水平降低的統(tǒng)計學(xué)顯著差異。然而，差異在治療 4 周后更明顯，并持續(xù)到治療后 8 周。

該研究還強調(diào)，透皮遞送的進一步改進將有助于外泌體產(chǎn)生更深遠(yuǎn)的黑色素減少活性，這是在體外基于細(xì)胞的測定中觀察到的。

實際已經(jīng)為美容或醫(yī)療目的開發(fā)了各種透皮給藥系統(tǒng)，包括化學(xué)促進劑、超聲波、離子電滲療法、微針、熱消融、微晶換膚術(shù)、電穿孔和空化超聲，以及已經(jīng)報道了基于角蛋白水凝膠的微針貼片、無針噴射注射器或離子電滲療法可以有效地透皮遞送外泌體。在研究期間和之后沒有皮膚異常（紅斑、水腫、脫屑、瘙癢、刺痛、灼痛、緊繃和刺痛）。