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尿液細胞外囊泡 (uEV) 成為各種腎臟疾病的非侵入性生物標志物，但尚不清楚腎單位質量的差異如何影響uEV 分泌。為了解決這個問題，來自荷蘭鹿特丹大學醫學中心的研究人員在人腎切除術和大鼠腎切除術之前和之后測量了 uEV 分泌，發現腎功能、腎體積和腎重量與uEV分泌有關，但由于肥大、腎切除術導致的uEV分泌減少低于預期。該研究發表于J Extracell Vesicles雜志上。

尿液來源的細胞外囊泡 (uEV) 是由腎臟和泌尿道細胞分泌的納米級膜囊泡。uEV來源于多泡體與細胞膜的融合（外泌體），或者來源于細胞膜的直接向外出芽（微泡和凋亡小體）。由于 uEV 蛋白質組和轉錄組包含許多與疾病相關的蛋白質和轉錄物，因此研究人員正在探索uEV 用于腎功能、腎臟疾病和泌尿系統疾病的非侵入性生物標志物。uEV 生物標志物已在急性腎損傷、多囊腎病、腎小球疾病和腎小管病患者中被發現。此外，還對 uEV 進行了分析，以確定腎移植功能和排斥反應的生物標志物。盡管在 uEV 中可檢測到許多蛋白質，但在臨床應用之前仍必須解決一些關于uEV 研究的方法學問題。?

由于臨床通量大、EV 貨物降解的風險較低，分析尿液中的uEV 生物標志物是最理想的選擇。因此，研究人員比較了幾種直接在微量尿液中標準化、量化和表征 uEV 的方法（即無需 uEV 分離）。在之前的這項研究中，uEV 使用納米粒子追蹤分析 (NTA)、基于 CD9 的時間分辨熒光免疫測定 (CD9-TR-FIA) 和最近開發的稱為 EVQuant 的方法進行量化和表征。使用這些方法，研究人員確定了在包括腎臟疾病在內的各種環境中，尿肌酐和 uEV 濃度之間的個體內和個體間呈正相關。因此，研究人員提出尿肌酐可用于使尿液中的 uEV 蛋白標準化。然而，一個仍未解決的問題是 uEV 分泌是否取決于腎單位質量以及腎單位損失對 uEV 分泌的影響。由于大部分 uEV 由腎上皮細胞分泌，因此預測腎單位損失將均勻地減少 uEV 分泌。

因此，在目前的研究中，研究人員假設腎功能、腎體積或腎重量（作為腎單位質量的代表）決定uEV 分泌，而腎切除術會減少 uEV 分泌。為了解決這個問題，研究人員分析了 24 小時內的 uEV 分泌，并在腎切除術前后患者以及腎切除術前后的大鼠中分析了供體的尿液。在男性和女性供體中，使用納米粒子追蹤分析、EVQuant 和 CD9 時間分辨熒光免疫測定法對無細胞現場尿樣和24小時尿樣中的uEV進行量化。結果顯示，女性供體的腎臟總體積 (TKV)顯著降低，排出的 uEV 比男性供體少49%。uEV分泌與估計的腎小球濾過率(eGFR)、肌酐清除率和TKV 呈正相關（R= 0.6-0.7）。將uEV/肌酐乘以24小時尿肌酐后，也可以從現場尿液中預測uEV分泌率。供體腎切除導致eGFR降低了36%±10%，但uEVs的分泌量僅降低了16%（CD9+ uEVs=37%，CD9-uEVs沒有減少）。在校正腎切除影響后，供體腎切除使 uEV 中的足細胞標志物 WT-1 和近端小管標志物 NHE3、NaPi-IIa和cubilin 增加了2到4倍。在大鼠中，GFR和腎臟重量的變化與uEV 分泌率的變化相關（R = 0.46-0.60，P在比較個體之間的 uEV 生物標志物時，應包括對腎單位質量或 uEV 分泌率的測量。

參考文獻：Nephron mass determines the excretionrate of urinary extracellular vesicles. J Extracell Vesicles. 2022Jan;11(1):e12181.

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