拆解我國首個人源干細胞國家標準，一份高質量細胞有哪些特質

培養(yǎng)基中培養(yǎng)14天后，

年輕組（19-40），中年齡組（41-60）和老年組（61-89歲）的干細胞計數對比

年輕態(tài)的干細胞胞體飽滿、呈明顯的梭形；

衰老的干細胞胞體寬大扁平

所以從年齡這個因素考慮，圍產組織來源的臍帶、胎盤、羊膜間充質干細胞（有零歲細胞之稱）應該是最優(yōu)的，年輕人的骨髓、脂肪間充質干細胞次之，老年人則不建議直接使用自體干細胞治療。

接下來，是供者本身的身體狀況。

《生物樣本庫多能干細胞管理技術規(guī)范》中要求使用已驗證過的方法對干細胞進行真菌、細菌、傳染病原體（包括HIV、HBV、HCV、HTLV、HCMV、EBV、TP等）和支原體檢測，但這些只能算是基礎。

除了病毒感染，許多疾病也會影響自體間充質干細胞的功能及效果，如遺傳性疾病、自身免疫性疾病和部分慢性疾病等等。

以常見的糖尿病為例，2017年《Stem Cells Translational Medicine》（影響因子：6.9）上有研究證實[2]：長期患有2型糖尿病會降低干細胞的增殖能力、免疫抑制潛力及存活率。

研究證實：長期患2型糖尿病及肥胖會影響自體骨髓間充質干細胞的療效。尤其是當你患有糖尿病超過10年且較為肥胖時，采用自體干細胞進行治療就不會是一個明智的選擇。

我們都知道，當干細胞回輸到體內，只有活著的干細胞能真正起到修復或治療的作用，失活細胞不僅有礙療效，有時還會“幫倒忙”，引發(fā)機體毒性反應。

所以細胞存活率不但關乎細胞質量，更涉及人體自身的安全。也正因如此，T/CSCB-0002和T/CSCB-0005都要求未凍存細胞存活率≥90%。

除了干細胞本身的活性外，存儲、運輸條件也會影響細胞活率。如果存儲或運輸條件不合格，則可能導致細胞死亡、細胞膜破裂及內容物釋放等。

生長活性其實有著許多評定標準，如細胞倍增時間、細胞周期、克隆形成率、端粒酶活性等等，而這些指標都被“細胞代次”所影響著。

細胞代次指的是干細胞在體外培養(yǎng)中的傳代次數，一般剛從臍帶、胎盤、羊膜等提取的干細胞是原始P0代，傳一代是P1代干細胞，并以此類推。在此過程中，還有一個關鍵特性：即干細胞的生物學效力和增殖特性，會隨著傳代次數的增加逐漸下降。

圖a代表P3代，圖b代表P8代

那按照這個邏輯，如果我們想追求高活性，只要使用剛從組織中分離出來的P0代干細胞不就行了嗎？事情沒有那么簡單。

首先，細胞代次并不宜低于3代。

處于這個代次的干細胞確實活性很高，可惜的是，它還沒能經過足夠的體外培養(yǎng)、擴增，這樣可能導致：

一、細胞總數量不夠。我們能看到在過往的干細胞臨床試驗里，干細胞回輸量幾乎都是千萬級以上的，而P0-P3代次的干細胞才剛剛開始培養(yǎng)，干細胞含量客觀來說很低，很有可能達不到使用標準。哪怕它各項活性都很好，也巧婦難為無米之炊。

二、細胞安全性不夠。培養(yǎng)時間短，也意味著來不及進行徹底凈化，其中可能殘留提取過程中感染的細菌、病毒、微生物等有害物質。盡管這些代次的干細胞有很高的活性，但于安全角度，卻十分堪憂。

這兩點是不能用前3代的原因，我們再來看看不必執(zhí)著前3代的理由。

從各代干細胞生長曲線檢測結果來看，P4-P7代的數據其實也都在高活性范圍之內，并未與前3代細胞形成斷層差距，所以總結所有優(yōu)勢與缺點，P0-P3代細胞并不是優(yōu)選。

體外培養(yǎng)P3/5/7/10/15代細胞的生長曲線

其次，細胞代次不宜高于7代。

P7代之后的干細胞，算是經過了足夠的培養(yǎng)擴增，這細胞數量是上去了，但質量也是斷崖式下跌。有研究表明，P7代次之后，干細胞增殖能力及遺傳穩(wěn)定性急劇下降，細胞凋亡的數量也很可怕，到了P15代晚期，凋亡細胞數量直奔50%，自然也不宜作為回輸的代次選擇。

所以在兼顧數量、安全及干細胞活性三方因素后，P3-P7代次的干細胞會是最佳選擇。

總的來說，一份細胞質量的好與壞，是由細胞活率、細胞來源、細胞活性等多重因素共同決定的。如果只看重某一指標，影響療效事小，引發(fā)安全問題事大。

不過隨著干細胞技術的日益成熟，國家也在不斷完善干細胞質量管控體系，整個行業(yè)正向著規(guī)范化、更加長遠地利于臨床轉化的方向發(fā)展。相信在未來，一份高質量干細胞并不需要我們擁有“火眼金睛”，更多人們可以切身體會到干細胞的神奇。