常見細(xì)胞因子及其檢測方法

? ?細(xì)胞因子是由免疫細(xì)胞（如單核、巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞等）和某些非免疫細(xì)胞（內(nèi)皮細(xì)胞、表皮細(xì)胞、纖維母細(xì)胞等）經(jīng)刺激而合成、分泌的一類具有廣泛生物學(xué)活性的小分子蛋白質(zhì)。其作用是通過結(jié)合相應(yīng)受體調(diào)節(jié)細(xì)胞生長、分化和效應(yīng)，調(diào)控免疫應(yīng)答。細(xì)胞因子，是細(xì)胞分化和行使功能時的產(chǎn)物，相當(dāng)于人體內(nèi)各類細(xì)胞間相互交流的“信使”。它們被廣泛地應(yīng)用于醫(yī)學(xué)診斷、抗癌治療、免疫調(diào)節(jié)、以及自身免疫等多種領(lǐng)域。

一、常見細(xì)胞因子

? 細(xì)胞因子可分為白細(xì)胞介素（interleukin, IL）、干擾素 （interferon, IFN）、腫 瘤 壞 死 因 子 （tumornecrosisfactor,TNF）、集落刺激因子（colony stimulating factor, CSF）、生長因子、趨化性細(xì)胞因子等。眾多的細(xì)胞因子在體內(nèi)通過旁分泌、自分泌或內(nèi)分泌等方式發(fā)揮作用，同時具有多效性、重疊性、拮抗性、協(xié)同性等多種生理特性，從而形成較復(fù)雜的細(xì)胞因子調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)，參與人體多種重要的生理功能。

二、常見細(xì)胞因子檢測方法

1、ELISA測定

? 酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體特異性結(jié)合進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法。

2、CBA測定

? Cytometric Bead Array(CBA)是指細(xì)胞因子微球檢測技術(shù)。即微量樣本多指標(biāo)流式蛋白定量技術(shù)是一個基于流式細(xì)胞檢測系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測方法，它能夠同時對單個樣品中的多個指標(biāo)進(jìn)行檢測。是一種基于流式細(xì)胞檢測系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測方法，它能夠同時對單個樣品中的多個指標(biāo)進(jìn)行檢測。

? 特點(diǎn)：樣本用量少，多指標(biāo)檢測；操作方便，節(jié)省時間；同一樣本同時檢測，誤差小，精密度高；標(biāo)準(zhǔn)曲線自動測定，專用軟件自動計算，檢測范圍寬，靈敏度高；無酶-底物背景干擾。

3、FCM測定

? 流式細(xì)胞術(shù)是一種生物學(xué)技術(shù)，用于對懸浮于流體中的微小顆粒進(jìn)行計數(shù)和分選。這種技術(shù)可以用來對流過光學(xué)或電子檢測器的一個個細(xì)胞進(jìn)行連續(xù)的多種參數(shù)分析。流式細(xì)胞術(shù)（Flow CytoMetry，F(xiàn)CM）是對懸液中的單細(xì)胞或其他生物粒子,通過檢測標(biāo)記的熒光信號，實(shí)現(xiàn)高速、逐一的細(xì)胞定量分析和分選的技術(shù)。

? 特點(diǎn)：可以檢測依托流式平臺檢測同時檢測多指標(biāo)。

4、RT-PCR測定

? 細(xì)胞因子的mRNA壽命短且拷貝數(shù)低，因此難以在小量樣本中進(jìn)行檢測。RT-PCR是一種能檢測細(xì)胞內(nèi)低豐度特異RNA的方法，其原理是首先以RNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下，合成與RNA互補(bǔ)的cDNA。然后以cDNA為模板，用PCR技術(shù)對靶序列進(jìn)行擴(kuò)增，使微量細(xì)胞因子的RNA經(jīng)放大后檢出。RT-PCR能檢出單個細(xì)胞中少于10個拷貝的特異RNA，如同時放大內(nèi)參照物（如β-Actin），即可對RT-PCR檢出的細(xì)胞因子mRNA進(jìn)行定量。