使用TIL進(jìn)行細(xì)胞療法：馴服T細(xì)胞以對(duì)抗癌癥

介紹

癌癥在復(fù)雜的組織微環(huán)境中發(fā)展，該環(huán)境由多種細(xì)胞組成，包括先天性和適應(yīng)性免疫細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞與免疫系統(tǒng)細(xì)胞之間存在動(dòng)態(tài)相互作用。有效的抗腫瘤免疫會(huì)導(dǎo)致腫瘤清除，但是，在某些情況下，腫瘤細(xì)胞會(huì)制定策略來(lái)逃避腫瘤免疫監(jiān)視并不受控制地繁殖 。

過(guò)繼細(xì)胞轉(zhuǎn)移(ACT)是一種基于細(xì)胞的療法，它使用患者自身（自體轉(zhuǎn)移）或供體（同種異體轉(zhuǎn)移）免疫細(xì)胞來(lái)改善免疫功能。在將免疫細(xì)胞作為治療劑輸回患者體內(nèi)之前，它們可以在體外進(jìn)行修飾和/或擴(kuò)增。在癌癥治療中，已經(jīng)開發(fā)出ACT策略來(lái)克服免疫系統(tǒng)對(duì)腫瘤的低反應(yīng)性并增強(qiáng)抗腫瘤免疫力。ACT提供的免疫亞型可包括基于樹突細(xì)胞(DC)、自然殺傷(NK)和T淋巴細(xì)胞(T)細(xì)胞的免疫療法，每種療法都處于臨床前和臨床開發(fā)的不同階段。在這里，我們將專注于基于T細(xì)胞的ACT，其中患者的腫瘤浸潤(rùn)性T細(xì)胞 (TIL) 被離體操作并重新注入患者體內(nèi)。

TIL ACT的歷史

圖 1 有助于開發(fā)基于 T 細(xì)胞的ACT的里程碑式發(fā)現(xiàn)

IL-2

Rosenberg及其同事發(fā)現(xiàn)，在IL-2存在下生長(zhǎng)的淋巴細(xì)胞能夠裂解新鮮的同系或自體腫瘤，同時(shí)不影響正常細(xì)胞。此外，實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ捅砻?，單?dú)高劑量注射IL-2、過(guò)繼轉(zhuǎn)移離體培養(yǎng)的淋巴細(xì)胞，或同時(shí)施用IL-2 和淋巴細(xì)胞都可以提供有效的抗腫瘤活性。在人體研究中，同時(shí)給予IL-2中升高的淋巴細(xì)胞和全身性IL-2治療導(dǎo)致轉(zhuǎn)移性黑色素瘤患者亞群的完全和持久的腫瘤消退。?

TILs

在早期的研究中，ACTs的T淋巴細(xì)胞是通過(guò)重復(fù)的淋巴細(xì)胞分離術(shù)從患者的外周血中獲得的。Rosenberg的團(tuán)隊(duì)是第一個(gè)將TIL 用于ACT的團(tuán)隊(duì)，其理由是TIL將富集腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞。值得注意的是，過(guò)繼轉(zhuǎn)移IL-2擴(kuò)增的TILs在介導(dǎo)小鼠已建立的肺和肝臟腫瘤消退方面比來(lái)自外周血的IL-2擴(kuò)增的淋巴細(xì)胞有效50到100倍。在重組IL-2存在的情況下，從切除的黑色素瘤中生長(zhǎng)的人類TIL對(duì)自體黑色素瘤顯示出高效力。值得注意的是，TIL可以高效擴(kuò)增（約 95,652倍，圖 2），同時(shí)保持強(qiáng)大的抗腫瘤細(xì)胞毒性功能。使用離體產(chǎn)生的自體TIL的過(guò)繼轉(zhuǎn)移，在轉(zhuǎn)移性黑色素瘤患者的初始臨床試驗(yàn)中觀察到34%的客觀反應(yīng)率。然而，即使一些患者表現(xiàn)出完全反應(yīng)，中位反應(yīng)率也僅為 4 個(gè)月。

圖2用于 ACT 的天然 TIL 的一般擴(kuò)增方案：已詳細(xì)描述了擴(kuò)展 TIL 用于臨床的方案。在麻醉下，從患者身上切除腫瘤并切成小塊或酶消化以獲得單細(xì)胞懸液。腫瘤片段在高劑量 IL-2 (6000 IU/mL) 中單獨(dú)生長(zhǎng)。在 IL-2的影響下，細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞會(huì)在2-3周內(nèi)過(guò)度生長(zhǎng)并殺死腫瘤。通過(guò)共培養(yǎng)IL-2引發(fā)的淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞來(lái)測(cè)試純淋巴細(xì)胞培養(yǎng)物的細(xì)胞毒性。對(duì)靶腫瘤具有高毒性的個(gè)體培養(yǎng)物可以在受照射的飼養(yǎng)淋巴細(xì)胞、一種針對(duì)人CD3中的epsilon亞基和IL-2的抗體存在下快速擴(kuò)增。使用這種方法，Rosenberg及其同事在大約5-6周內(nèi)收獲了大約 10¹¹個(gè)淋巴細(xì)胞，用于輸注到患者體內(nèi)。在后來(lái)的研究中，由 60mg/kg環(huán)磷酰胺2天和25mg/m2氟達(dá)拉濱給藥5天組成的淋巴去除準(zhǔn)備方案證明了ACTs的顯著效果。患者在淋巴耗竭后以 720,000 IU/kg 的劑量輸注細(xì)胞和IL-2以達(dá)到耐受性。

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淋巴耗竭

T細(xì)胞ACT歷史上的另一個(gè)基石事件是發(fā)現(xiàn)淋巴耗竭可以顯著增加體內(nèi)轉(zhuǎn)移的T細(xì)胞的持久性。具體而言，由60mg/kg環(huán)磷酰胺2 天和25mg/m2氟達(dá)拉濱在ACT前給藥5天組成的淋巴去除準(zhǔn)備方案增加了轉(zhuǎn)移性黑色素瘤患者的臨床反應(yīng)率和持續(xù)時(shí)間（圖 2）。在招募的93名患者中，20名(22%)表現(xiàn)出完全的腫瘤消退，其中19名在治療后3年完全緩解。

仍在探索淋巴耗竭方案增強(qiáng)輸注TIL功能的細(xì)胞和分子機(jī)制。在小鼠模型和人類中，細(xì)胞轉(zhuǎn)移前的淋巴去除顯示出通過(guò)增強(qiáng)轉(zhuǎn)移細(xì)胞的持久性，ACTs的有效性得到了多方面的改善。

結(jié)合淋巴去除方案的研究記錄了患者外周血中富集的CD8 T細(xì)胞 。已顯示淋巴去除可誘導(dǎo)細(xì)胞因子IL-7和IL-15，這兩種細(xì)胞因子都參與T細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)，并在缺乏內(nèi)源性淋巴細(xì)胞的情況下促進(jìn)轉(zhuǎn)移的T細(xì)胞的擴(kuò)增。

從小鼠研究中獲得的見解表明，淋巴去除可以通過(guò)消除免疫抑制細(xì)胞，如髓源性抑制細(xì)胞(MDSC)和FoxP3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg) 來(lái)增強(qiáng)TIL的功效。

在人體研究和臨床研究中，淋巴細(xì)胞清除后FoxP3+抑制性T細(xì)胞的重新出現(xiàn)與對(duì)ACT的臨床反應(yīng)呈負(fù)相關(guān)。還提出了淋巴去除方案，通過(guò)微生物群的動(dòng)員以及TIL和嵌合抗原受體工程化的 T 細(xì)胞（CAR-T細(xì)胞）的持續(xù)和擴(kuò)增，提供微生物衍生的佐劑，例如Toll 樣受體配體。獲得進(jìn)一步的機(jī)制見解將導(dǎo)致更好的ACTs組合方法來(lái)誘導(dǎo)強(qiáng)大的腫瘤特異性免疫。

調(diào)整TIL ACT以靶向腫瘤抗原

未選擇的TIL產(chǎn)品由具有不同特異性的腫瘤衍生T細(xì)胞組成。雖然與循環(huán)T細(xì)胞相比，TIL富含腫瘤特異性T細(xì)胞，但它們也包含非特異性細(xì)胞。因此，并非所有TIL ACT產(chǎn)品中的T細(xì)胞都預(yù)期具有有效的腫瘤反應(yīng)性。這對(duì)于在抗原譜方面與患者正常組織沒有太大區(qū)別的腫瘤尤其相關(guān)。事實(shí)上，具有低水平獨(dú)特抗原的腫瘤可能含有低水平的腫瘤特異性TIL，因此，可能會(huì)產(chǎn)生療效欠佳的TIL ACT產(chǎn)品。識(shí)別和選擇性擴(kuò)增對(duì)獨(dú)特腫瘤抗原具有預(yù)定義特異性的T細(xì)胞是增加此類個(gè)體成功ACT機(jī)會(huì)的有前途的策略。目前有幾種策略正在臨床開發(fā)中，以識(shí)別腫瘤相關(guān)抗原并生成個(gè)性化的ACT產(chǎn)品以實(shí)現(xiàn)卓越的腫瘤控制。

TIL ACT 靶向腫瘤新抗原

也許個(gè)性化TIL ACT的最先進(jìn)策略是識(shí)別和擴(kuò)展具有針對(duì)腫瘤新抗原的TCR的TIL。腫瘤通常在其DNA中表現(xiàn)出獨(dú)特的改變，例如單核苷酸變化，以及在腫瘤中積累并導(dǎo)致移碼和結(jié)構(gòu)變異的插入和缺失。新抗原是改變基因的蛋白質(zhì)產(chǎn)物，由能夠引發(fā)T細(xì)胞反應(yīng)的MHC分子加工和呈遞。由于癌癥新抗原構(gòu)成“非自身”這一事實(shí)，識(shí)別胸腺中出現(xiàn)的新抗原的T細(xì)胞將逃避宿主中樞耐受機(jī)制，從而消除自身反應(yīng)性T細(xì)胞。由于新抗原在腫瘤中的表達(dá)受到限制，因此新抗原特異性T細(xì)胞不太可能產(chǎn)生“在靶點(diǎn)、腫瘤外”的毒性。最后，新抗原特異性T細(xì)胞的產(chǎn)生是一個(gè)隨機(jī)事件。并非所有隨機(jī)突變都會(huì)影響蛋白質(zhì)編碼區(qū)，也并非所有突變蛋白質(zhì)都能被T細(xì)胞識(shí)別。給定腫瘤的體細(xì)胞突變?cè)蕉?，該腫瘤擁有新抗原并對(duì)刺激內(nèi)源性抗腫瘤免疫的藥物作出反應(yīng)的可能性就越大。通過(guò)適當(dāng)?shù)纳a(chǎn)管道，即使是針對(duì)稀有腫瘤新抗原的少量T 細(xì)胞也可以擴(kuò)展用于治療應(yīng)用?；谶@些考慮，帶有富含新抗原特異性T細(xì)胞的TIL的ACT是一種有吸引力的治療選擇，尤其是對(duì)于突變負(fù)荷低的腫瘤。

在認(rèn)識(shí)到新抗原特異性T細(xì)胞在維持TIL ACT后的持久反應(yīng)方面發(fā)揮關(guān)鍵作用后，從TIL中分離新抗原特異性T細(xì)胞的努力取得了進(jìn)展。Huang等人發(fā)現(xiàn)，多發(fā)轉(zhuǎn)移性黑色素瘤病變消退的患者中的 T 細(xì)胞由識(shí)別腫瘤抑制基因CDKN2A移碼產(chǎn)物和突變的HLA I類基因產(chǎn)物的克隆組成。

周等人報(bào)道了在另一名患者中發(fā)現(xiàn)突變的生長(zhǎng)停滯特異性基因 7 (GAS7)和3-磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)基因產(chǎn)物，該患者顯示 TIL 治療后肺和軟組織中的所有轉(zhuǎn)移性病變完全消退。這項(xiàng)研究使用 T 細(xì)胞受體β鏈(TCRb)的直接測(cè)序分析，發(fā)現(xiàn)至少有六種克隆型在治療后在外周血中持續(xù)存在數(shù)月，包括識(shí)別GAS7和GAPDH的克隆型。已經(jīng)出現(xiàn)的其他一些報(bào)告證明了腫瘤新抗原特異性 T 細(xì)胞克隆在維持持久的抗腫瘤反應(yīng)方面的重要貢獻(xiàn)。

最初的研究利用自體腫瘤細(xì)胞cDNA文庫(kù)來(lái)篩選新抗原特異性 T 細(xì)胞。這些方法很麻煩，阻礙了新抗原發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用的進(jìn)展。后來(lái)，Rosenberg及其同事設(shè)計(jì)了一種概念上的新策略，如圖 3所示，不需要費(fèi)力的cDNA文庫(kù)篩選。

在這種方法中，腫瘤和健康組織的NGS 外顯子組測(cè)序數(shù)據(jù)的比較分析用于鑒定突變蛋白。通過(guò)腫瘤組織的 RNAseq測(cè)量突變蛋白的表達(dá)。使用主要的組織相容性復(fù)合物結(jié)合算法，鑒定、合成推定的T細(xì)胞表位，然后評(píng)估TIL的識(shí)別。這種過(guò)濾方法顯著減少了用于T細(xì)胞反應(yīng)性測(cè)定的候選新抗原的數(shù)量 。其他幾項(xiàng)研究也表明，從小鼠和人類腫瘤的NGS外顯子組測(cè)序中獲得的癌癥基因組數(shù)據(jù)可用于發(fā)現(xiàn)推定的新抗原，并作為T 細(xì)胞對(duì)這些新抗原的反應(yīng)性分析。使用這些方法，已在多種癌癥中鑒定出新抗原和 T 細(xì)胞對(duì)這些新抗原的反應(yīng)性，包括 NSCLC、卵巢癌、頭頸部鱗狀細(xì)胞癌、膽管癌和結(jié)直腸癌。最近，研究人員已經(jīng)證明，編碼推定的新抗原的串聯(lián)小基因(TMG)文庫(kù)可用于篩選治療性TIL和鑒定新抗原特異性T細(xì)胞。

圖 3 新抗原發(fā)現(xiàn)流程示意圖

一旦確定了新抗原特異性 T 細(xì)胞，它們就可以使用流式細(xì)胞儀 進(jìn)一步純化，并使用圖 2中描述的策略進(jìn)行體外擴(kuò)增。從TIL培養(yǎng)物中富集并選擇的新抗原特異性CD4 T和CD8 T細(xì)胞的轉(zhuǎn)移對(duì)新抗原具有高反應(yīng)性的基礎(chǔ)，已經(jīng)顯示出完全和部分反應(yīng)，這些反應(yīng)在轉(zhuǎn)移性膽管癌、結(jié)直腸癌和乳腺癌患者中是持久的。然而，在其他研究中，來(lái)自轉(zhuǎn)移性胃腸癌患者的TIL培養(yǎng)物的新抗原特異性T細(xì)胞顯示出有限的臨床反應(yīng)。

導(dǎo)致TIL衍生的新抗原特異性T細(xì)胞療效不佳的一個(gè)潛在因素是抑制性腫瘤微環(huán)境誘導(dǎo)的腫瘤浸潤(rùn)性T細(xì)胞不可逆的低反應(yīng)性。已探索產(chǎn)生有效ACT療法的另一種策略是在體外激活初始腫瘤特異性T細(xì)胞或通過(guò)TCR基因工程從頭生成新抗原特異性T細(xì)胞。后一種使用TCR工程化 T細(xì)胞的ACT方法已在別處詳細(xì)描述。

第一種方法的一個(gè)例子來(lái)自Verdegaal等人的研究。在這項(xiàng)研究中，自體黑色素瘤細(xì)胞系與自體外周血細(xì)胞一起培養(yǎng)，以激活和擴(kuò)增腫瘤特異性T細(xì)胞。對(duì)輸注批次的腫瘤特異性T細(xì)胞的分析揭示了多克隆腫瘤反應(yīng)性CD8 T和CD4 T細(xì)胞的存在。在輸注所得產(chǎn)品的 10名患者中，1名患者完全緩解，1名患者部分緩解，3名患者病情穩(wěn)定。這表明自體PBMC可能是 ACT 的新抗原特異性T細(xì)胞的可行來(lái)源。目前，正在努力開發(fā)用于分離新抗原特異性T細(xì)胞及其快速擴(kuò)增的有效策略，這可以進(jìn)一步幫助新抗原特異性T細(xì)胞的ACTs。

TIL ACT靶向癌癥/睪丸抗原和腫瘤過(guò)度表達(dá)的蛋白質(zhì)

為增強(qiáng)T細(xì)胞ACT產(chǎn)品的腫瘤特異性而探索的另一種策略是將它們靶向癌癥/睪丸抗原。癌癥/睪丸抗原是一組通常在免疫特權(quán)組織中表達(dá)的蛋白質(zhì)，例如睪丸生殖細(xì)胞和胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞，但不在成人體細(xì)胞中表達(dá)。一些惡性腫瘤重新表達(dá)癌癥/睪丸抗原，這為開發(fā)針對(duì)這些分子的免疫療法提供了機(jī)會(huì)。

與每個(gè)患者獨(dú)特的腫瘤新抗原不同，癌癥/睪丸抗原是共享的，提供了更簡(jiǎn)化的生產(chǎn)過(guò)程。正如Whitehurst等人綜述的那樣，70%的轉(zhuǎn)移性黑色素瘤表達(dá)MAGEA-1-4，70%的卵巢腫瘤表達(dá)ACRBP，46%的乳腺癌表達(dá)NY-ESO-1。已經(jīng)在黑色素瘤和滑膜肉瘤中測(cè)試了被設(shè)計(jì)為表達(dá)NY-ESO-1特異性T細(xì)胞受體的T細(xì)胞的過(guò)繼轉(zhuǎn)移，反應(yīng)率分別高達(dá)45%和 67%。

此外，另一項(xiàng)研究報(bào)告了9名黑色素瘤患者中有5名接受自體抗 MAGE-A3 TCR工程化 T 細(xì)胞治療后腫瘤消退。然而，也報(bào)告了神經(jīng)系統(tǒng)毒性。

?不同的腫瘤類型可以顯示高水平的某些正常的非突變蛋白質(zhì)。例如，黑色素細(xì)胞產(chǎn)生的腫瘤，包括皮膚和葡萄膜黑色素瘤，高水平表達(dá)參與黑色素生物合成途徑的蛋白質(zhì)，如MART-1和gp100。然而，正常的非惡性黑素細(xì)胞也高度表達(dá)這些蛋白質(zhì)。毫不奇怪，針對(duì)黑色素瘤譜系標(biāo)志物的 CT的臨床開發(fā)取得了有限的成功。例如，外周 T細(xì)胞的ACT 被設(shè)計(jì)為表達(dá)對(duì)MART-1和gp100具有高親和力的TCR，不僅針對(duì)腫瘤細(xì)胞，還針對(duì)眼睛和耳朵中的正常黑素細(xì)胞。這導(dǎo)致了葡萄膜炎和聽力損失。盡管ACT靶向黑色素細(xì)胞標(biāo)志物的療效很有希望，導(dǎo)致30%的受試對(duì)象的癌癥消退，但仍需要解決大量靶標(biāo)毒性以進(jìn)一步開發(fā)這些策略。

TIL ACT 臨床開發(fā)的現(xiàn)狀

迄今為止，已經(jīng)完成了許多TIL ACT研究，其中一些研究結(jié)果令人鼓舞。根據(jù)報(bào)告的數(shù)據(jù)，TIL ACT最突出的抗腫瘤活性見于黑色素瘤患者。Dafni等人進(jìn)行的系統(tǒng)評(píng)價(jià)和薈萃分析研究很好地說(shuō)明了這一點(diǎn)。作者分析了13項(xiàng)TIL ACT聯(lián)合IL-2給藥的臨床研究，包括7項(xiàng)使用高劑量IL-2的研究。研究是在2005-2016年期間進(jìn)行的。與低劑量IL-2相比，高劑量IL-2 和TIL ACT產(chǎn)生更好的反應(yīng)率。根據(jù)來(lái)自總共332名患者的七項(xiàng)單獨(dú)研究的綜合數(shù)據(jù)，TIL ACT和高IL-2治療的平均客觀緩解率為44%。49名患者報(bào)告了持久的完全緩解。

雖然 TIL ACT尚未獲得FDA批準(zhǔn)用于治療實(shí)體瘤，但它正在積極的臨床開發(fā)中。許多臨床試驗(yàn)報(bào)告了令人鼓舞的結(jié)果。由 Iovance Biotherapeutics 開發(fā)的商業(yè)自體TIL產(chǎn)品lifileucel（LN-145、LN-144 和 LN-145-S1）處于II期臨床開發(fā)階段，用于治療不可切除或轉(zhuǎn)移性黑色素瘤、復(fù)發(fā)性或轉(zhuǎn)移性頭頸部鱗狀細(xì)胞癌患者(HNSCC)、復(fù)發(fā)性或轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌 (NSCLC) 或復(fù)發(fā)性或難治性 NSCLC。公司披露的制造工藝相對(duì)簡(jiǎn)單。手術(shù)切除的腫瘤細(xì)胞被運(yùn)送到中央制造設(shè)施，在那里它們?cè)贗L-2存在的情況下被破碎和培養(yǎng)，以允許 TIL從腫瘤中流出并擴(kuò)大到每個(gè)培養(yǎng)物大約 10⁹-10¹¹個(gè)細(xì)胞。接下來(lái)，將TIL清洗，放入輸液袋并冷凍保存。在2020年美國(guó)臨床腫瘤學(xué)會(huì)(ASCO)年會(huì)上公布了66名經(jīng)過(guò)大量預(yù)處理的黑色素瘤患者的數(shù)據(jù)。該研究招募了在多種先前療法中取得進(jìn)展的患者，包括免疫檢查點(diǎn)阻斷和BRAF抑制，并且還表現(xiàn)出高腫瘤負(fù)荷，其中許多患有肝臟和大腦病變。值得注意的是，在單次輸注 lifileucel以及淋巴去除和IL-2方案后，總體反應(yīng)率為 36.4%。從這個(gè)角度來(lái)看，化療是目前可用于參與該試驗(yàn)的患者群體的唯一治療選擇?；焹H對(duì)10%的患者有效，而且反應(yīng)通常持續(xù)時(shí)間很短。

Iovance 開發(fā)的另一種TIL產(chǎn)品LN-145在27名接受過(guò)至少一種先前化療的晚期宮頸癌患者中顯示出有希望的初步療效結(jié)果。根據(jù)ASCO 2019年的一份報(bào)告，觀察到44%的客觀響應(yīng)率，其中包括1個(gè)完全響應(yīng)和9個(gè)部分響應(yīng)。相比之下，這些患者批準(zhǔn)的二線化療和免疫治療的客觀緩解率在4-14% 范圍內(nèi) 。毫不奇怪，F(xiàn)DA已授予 LN-145 突破性療法稱號(hào)，用于治療化療期間或之后疾病進(jìn)展的復(fù)發(fā)性、轉(zhuǎn)移性或持續(xù)性宮頸癌。突破性療法認(rèn)定旨在在初步臨床證據(jù)表明該藥物可能比現(xiàn)有療法提供實(shí)質(zhì)性改進(jìn)的情況下加快新興療法的開發(fā)。如果lifileucel和LN-145的初步療效在更大的隊(duì)列中保持并且反應(yīng)是持久的，我們可能會(huì)期待FDA在不久的將來(lái)批準(zhǔn)TIL ACT用于實(shí)體瘤。

有一些臨床證據(jù)表明，TIL ACT可能對(duì)黑色素瘤和宮頸癌以外的腫瘤患者有效。評(píng)估TIL ACT治療轉(zhuǎn)移性 NSCLC 的 I 期臨床試驗(yàn)的初步結(jié)果非常令人鼓舞。在這項(xiàng)研究中，95% 的患者成功地?cái)U(kuò)大了TIL?？偣舱心剂?20名患者，其中 13 名顯示出納武單抗治療進(jìn)展的證據(jù)?；颊呓邮墉h(huán)磷酰胺/氟達(dá)拉濱淋巴清除治療，然后用 TIL和IL-2進(jìn)行ACT。大多數(shù)患者在使用TIL后出現(xiàn)腫瘤消退（TIL 后的中位試驗(yàn)時(shí)間為1.4年）。兩名患者在TIL給藥后1年取得了持久的臨床反應(yīng)。

此外，病例報(bào)告表明，在轉(zhuǎn)移性乳腺癌、轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌 (93) 和轉(zhuǎn)移性膽管癌患者中，TIL ACT后可持久緩解。截至 2021 年 3 月 12 日，有許多TIL ACT 臨床研究招募患者，包括膽道癌試驗(yàn) (NCT03801083)、轉(zhuǎn)移性葡萄膜黑色素瘤 (NCT03467516)、婦科腫瘤 (NCT04766320)、預(yù)先治療的轉(zhuǎn)移性三陰性乳腺癌 (NCT03801083)、非小細(xì)胞肺癌 (NCT04614103)、結(jié)直腸癌 (NCT03904537)、卵巢癌(NCT04072263)、宮頸癌 (NCT04443296)、復(fù)發(fā)性或難治性卵巢癌、未分化甲狀腺癌、骨肉瘤或其他骨和軟組織肉瘤 (NCT04443296)。

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TIL ACT 在當(dāng)前癌癥免疫治療領(lǐng)域的好時(shí)機(jī)

目前，正在進(jìn)行黑色素瘤和宮頸癌的關(guān)鍵TIL ACT試驗(yàn)。這些試驗(yàn)的結(jié)果將指導(dǎo)FDA批準(zhǔn)這種治療用于臨床的決定。如果我們要保持樂觀的前景，現(xiàn)在可能是考慮 TIL ACT 如何融入當(dāng)前癌癥治療工具集的好時(shí)機(jī)（圖 4）。

圖 4 選擇患者進(jìn)行TIL ACT給藥的潛在策略。建議的候選者包括病毒感染的腫瘤患者和對(duì)ICB治療產(chǎn)生耐藥性的患者。具有高突變負(fù)荷的腫瘤可能會(huì)對(duì)具有未選擇TIL的ACT產(chǎn)生反應(yīng)，而免疫原性較差的腫瘤可能會(huì)受益于特定腫瘤新抗原的鑒定和針對(duì)這些新抗原的專門TIL-ACT產(chǎn)品的產(chǎn)生。

TIL ACT 的常見毒性

毒性始終是任何新興療法的關(guān)注點(diǎn)。根據(jù)早期臨床研究的安全性數(shù)據(jù)，TIL ACT具有較好的安全性。很多時(shí)候，副作用與與TIL 聯(lián)合給藥的聯(lián)合治療有關(guān)，例如IL-2和化療方案。毒性可以立即觀察到，也可以延遲發(fā)作。幾乎所有接受非清髓性淋巴耗竭化療的患者都會(huì)出現(xiàn)血細(xì)胞減少癥，包括中性粒細(xì)胞減少癥、淋巴細(xì)胞減少癥以及CD4 T細(xì)胞的長(zhǎng)期抑制。這些血液學(xué)副作用按照標(biāo)準(zhǔn)的良好臨床實(shí)踐進(jìn)行管理?；颊呓邮芰＜?xì)胞集落刺激因子(G-CSF)和血液衍生產(chǎn)品的輸血治療。與淋巴耗竭方案相關(guān)的非血液學(xué)毒性包括腹瀉、高膽紅素血癥和氟達(dá)拉濱引起的神經(jīng)毒性。少數(shù)患者可能會(huì)發(fā)生機(jī)會(huì)性感染，例如肺囊蟲肺炎或帶狀皰疹再激活，這些感染可通過(guò)化療后的常規(guī)預(yù)防治療來(lái)控制。

與TIL輸注產(chǎn)品相關(guān)的高級(jí)別毒性非常罕見，通常難以與TIL 產(chǎn)品本身中殘留IL-2相關(guān)的反應(yīng)區(qū)分開來(lái)。伴隨發(fā)熱、皮膚反應(yīng)和呼吸困難的急性細(xì)胞因子釋放是常見的過(guò)敏反應(yīng)。自身免疫反應(yīng)主要與黑色素細(xì)胞破壞有關(guān)，分別在35%和15%的病例中表現(xiàn)為白斑或葡萄膜炎。高劑量的IL-2與可通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)干預(yù)措施控制的瞬時(shí)毒性有關(guān)。采用淋巴清除方案后，IL-2的毒性受到極大限制，因?yàn)槊庖吖δ苷５膫€(gè)體中的淋巴細(xì)胞是導(dǎo)致IL-2相關(guān)副作用的細(xì)胞因子的主要來(lái)源。IL-2毒性可影響多個(gè)器官，例如心臟、肺、腎臟和中樞神經(jīng)系統(tǒng)。臨床醫(yī)生在管理與IL-2相關(guān)的毒性方面獲得了全球經(jīng)驗(yàn)，并且出現(xiàn)了標(biāo)準(zhǔn)化指南。

總之，TIL治療存在多種毒性，其中大部分毒性較低，可通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)支持治療進(jìn)行控制。TIL治療需要專門的護(hù)理中心來(lái)管理相關(guān)的毒性。

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結(jié)論

TIL ACT是一種很有前景的新興實(shí)體瘤免疫療法，很可能在不久的將來(lái)應(yīng)用于臨床實(shí)踐。

TIL ACT不可否認(rèn)的優(yōu)勢(shì)是a) 強(qiáng)大且可重復(fù)的臨床反應(yīng)，以及 b) 能夠使已用完其他治療選擇的晚期腫瘤患者受益。然而，這些療法的生產(chǎn)和交付存在許多挑戰(zhàn)。

TIL ACT是終極的個(gè)性化治療，因?yàn)楸仨殲槊课换颊咧圃焯囟ǖ妮斠寒a(chǎn)品。這需要高度專業(yè)化的良好生產(chǎn)規(guī)范(GMP)設(shè)施和訓(xùn)練有素的員工，從而導(dǎo)致高成本。此外，生產(chǎn)過(guò)程需要時(shí)間，通常超過(guò)一個(gè)月，這對(duì)于快速進(jìn)展的腫瘤患者來(lái)說(shuō)可能太長(zhǎng)了。

TIL ACT的商業(yè)化和制造過(guò)程的簡(jiǎn)化正在逐步解決TIL ACT的后勤挑戰(zhàn)，以實(shí)現(xiàn)這種有前途的治療方式的廣泛臨床應(yīng)用。